1.抗体选择：CO-IP需要特异性的抗体，而Pull Down需要选择合适的亲和标记。抗体的选择和亲和标记的引入都可能对蛋白质的结构和功能产生影响，需要谨慎考虑。2.操作复杂度：CO-IP操作相对复杂，需要多个步骤和较长的时间；而Pull Down操作相对简单，时间较短，适用于高通量实验。3.结果解读：CO-IP可以保留蛋白质的天...
Pull-down与Co-IP的原理类似, 均是利用亲和配体捕获互作蛋白。不同之处在于Pull-down利用1个纯化且含有标签的蛋白作为诱饵来结合互作蛋白, 通常用来证明蛋白之间直接的相互作用; Co-IP则采用固定的抗体捕获互作蛋白, 用来证明2个蛋白之间的相互作用, 但是不排除通过第3个蛋白介导的间接互作。下面我们将详细介绍GST标...
1.抗体选择:CO-IP需要特异性的抗体,而Pull Down需要选择合适的亲和标记。抗体的选择和亲和标记的引入都可能对蛋白质的结构和功能产生影响,需要谨慎考虑。 2.操作复杂度:CO-IP操作相对复杂,需要多个步骤和较长的时间;而Pull Down操作相对简单,时间较短,适用于高通量实验。 3.结果解读:CO-IP可以保留蛋白质的天然结...
区别一：Co-IP作用：Co-IP，证明两个蛋白在胞内有相互作用，但是这个作用可以是直接相互作用，也可以是形成复合物后的间接相互作用。区别二：pull-down作用：pull-down，胞外纯化蛋白后证明两个蛋白之间有相互作用，这个相互作用必然是直接相互作用。区别三：Co-IP，in vivo作用：Co-IP，in vivo，可以...
Pull-down (表1)和Co-IP (表2)所用的试剂配方如下。 4 仪器设备 超声波细胞粉碎机(JY92-IIN, 宁波新芝生物科技股份有限公司)为Pull-down技术专用; 控温摇床、微量分光光度计(Nano-300)、微量离心机、台式离心机、水浴锅、静音混合...
免疫共沉淀 (Co-IP) 和沉降 The pull-down assay is a robust method by which a target protein is extracted from a mixture (e.g., cell lysate or serum) via its affinity to a specially prepared solid support. It is often possible to detect...
蛋白A 和 G 涂覆的 DynaBeads 选择:表面激活的 Dynabeads 磁珠 选择:免疫沉淀、免疫共沉淀和 Pull-Down 磁力架 视频:DynaBeads™ 与琼脂糖 视频:如何使用 Dynabeads™ 进行免疫沉淀 使用琼脂糖和其他树脂进行免疫沉淀 概述:使用琼脂糖和其他树脂进行免疫沉淀 选...
综合而言, GST pull-down实验和CoIP实验其实是相互补充的两种实验方法,通过二者结合,我们才能更准确地了解两个蛋白之间的真实互作情况。 对于很多文献中 CoIP和 GST pull-down实验结果图,许多刚踏入科研领域的小伙伴可能不是很熟悉,看不大明白。今天咱们就根据文献案例来具体展示一下两种实验结果的分析过程。 本次以...
CO-IP可以分为在目的细胞中的内源性IP和在工具细胞系(一般为293T)的外源性CO-IP。而GST-Pull down可作为在原核生物中表达的蛋白,已经完全脱离了细胞环境,只有真正有相互作用的蛋白才能被拉下来。 免疫共沉淀 …
GST pull-down和co-immunoprecipitation(co-IP)都是目前常用的蛋白质交互作用检测方法,它们的区别在于: 1. GST pull-down通常用来检测大量的非特异性蛋白质与目标蛋白相互作用。GST是一种载体蛋白,可以通过将其连接到表达靶蛋白上,在混合 物中捕获与该靶蛋白有相互作用的其他蛋白质。之后,利用GST标记的固定矩阵,用于...