这些技术作为如今的研究中的常客，其中IP-MS是常用的在植物体内筛选互作蛋白的有效方法，Co-IP则常用于筛选后的蛋白之间的点对点验证，ChIP是用来研究蛋白质与DNA是否在体内存在相互作用，常用来检测转录因子结合位点，RIP用来研究细胞内RNA与蛋白质结合的技术，今天小源将选择IP-MS和Co-IP这两种技术，从原理、实验步骤...
这些技术作为如今的研究中的常客,其中IP-MS是常用的在植物体内筛选互作蛋白的有效方法,Co-IP则常用于筛选后的蛋白之间的点对点验证,ChIP是用来研究蛋白质与DNA是否在体内存在相互作用,常用来检测转录因子结合位点,RIP用来研究细胞内RNA与蛋白质结合的技术。 今天小源将选择IP-MS和Co-IP这两种技术,从原理、实验步骤、...
IP-MS(免疫共沉淀质谱分析)和Co-IP MS(共免疫共沉淀质谱分析)都是研究蛋白质相互作用的技术,主要区别在于目标蛋白质的选择和识别过程: 1.IP-MS: 先通过特异性抗体与目标蛋白质结合,形成抗体-蛋白质复合物,然后通过沉淀这些复合物,再利用质谱技术对沉淀物中的蛋白质进行鉴定。这种方法主要用于鉴定一个已知目标蛋白...
在Potein A/G磁珠实验中,使用WB检测时,使用的抗体也有可能会被二抗识别,影响实验结果。 解决方案:1、假如用鼠源的抗体来做Co-IP,则使用兔源抗体来做WB检测。 2、也可以使用特异性识别轻链和重链的二抗来检测,55Kda和25kDa是IgG蛋白的重链和轻链。(我本人的蛋白是22Kda左右,会被轻链IgG影响,可以购买特异性识别...
7. 做Co-IP或者IP-MS实验时,稳定转基因材料和原生质体/烟草叶片应该怎么选择? 如果实验条件允许,一般是推荐使用稳定转基因材料去做实验,这样能更加准确地反应植物体内真实的相互作用,如果实验条件不允许,例如研究的物种没有稳转体系或者赶时间,就可以选择原生质体或者烟草叶片进行实验。