1.蛋白质复合物的组成和结构分析:通过IP和Co-IP技术,可以分离出蛋白质复合物,并通过质谱等方法分析其组成和结构,从而揭示蛋白质相互作用的机制。2.药物靶点的筛选:通过IP和Co-IP技术,可以筛选出与目标蛋白质相互作用的蛋白质,从而寻找新的药物靶点。3.疾病相关蛋白质相互作用的研究:通过IP和Co-IP技术,可以...
一、原理要掌握 Co-IP:是研究蛋白相互作用的传统“金标准”,是免疫沉淀技术的延伸,是利用特异性抗体捕获抗原,并进一步捕获与目标抗原相互作用的蛋白,然后再通过固相介质(如磁珠或琼脂糖珠)将目标抗原与其相互作用的蛋白富集下来。这其实与钓鱼很像,我们可以把固相介质想象为钓鱼者,抗体就是鱼竿鱼线,诱饵蛋白就是鱼饵,...
免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶联的agarose或Sepharose珠子孵育,通过离心得…
1.蛋白质复合物的组成和结构分析:通过IP和Co-IP技术,可以分离出蛋白质复合物,并通过质谱等方法分析其组成和结构,从而揭示蛋白质相互作用的机制。 2.药物靶点的筛选:通过IP和Co-IP技术,可以筛选出与目标蛋白质相互作用的蛋白质,从而寻找新的药物靶点。
蛋白质是细胞中最重要的分子之一,它们在细胞内发挥着各种各样的功能。蛋白质之间的相互作用是细胞内许多生物学过程的基础。因此,了解蛋白质之间的相互作用是非常重要的。其中,免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)和共免疫沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是解析
提供新鲜样本材料和IP及WB的一抗(或由我公司代购)注:免疫共沉淀(co-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜...
Co-IP技术的基本步骤与IP技术类似,但是需要在第2步中加入与目标蛋白质相互作用的抗体。 1 .蛋白质复合物的组成和结构分析:通过IP和Co-IP技术,可以分离出蛋白质复合物,并通过质谱等方法分析其组成和结…
Co-IP和IP区别: Co-IP:研究的是体内自然状态下的蛋白质互相作用,不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的。 IP:根据抗原和抗体的特异性结合,利用抗体将靶标蛋白分离或纯化,检测某一种蛋白的表达情况。 传统IP和Co-IP基本步骤: 1.添加合适的抗体。
从图中可以得到,A蛋白带有GFP标签,B蛋白带有FLAG标签。该Co-IP实验被分为两组,一组是空载GFP标签和Protein B-FLAG共表达,另一组为Protein A-GFP和Protein B-FLAG共表达。图中有两个胶图分别为Input组和IP(α-GFP)组。IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“...
Co-IP和IP区别: Co-IP:研究的是体内自然状态下的蛋白质互相作用,不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的。 IP:根据抗原和抗体的特异性结合,利用抗体将靶标蛋白分离或纯化,检测某一种蛋白的表达情况。 传统IP和Co-IP基本步骤: 1.添加合适的抗体。 2.抗体与目标蛋白结合。 3.添加Protein A/G使抗体-蛋...