另外,CO-IP(免疫共沉淀)一般分为内源性和外源性,我们可以简单理解为内源性CO-IP是检测细胞本身含有的蛋白A和蛋白B互作有无;外源性CO-IP是将蛋白A和蛋白B在细胞内过表达后,再检测二者互作有无。 对于内源性Co-IP实验,如果出现阴性结果,也有可能是蛋白在细胞内表达过低导致,这种情况也可以先做过表达Co-IP作为...
在免疫沉淀串联质谱(IP-MS)实验过程中,质谱检测环节对于实验组和对照组是一致的,其差异主要体现在IP实验环节,在进行Co-IP后做质谱实验分组的设计时,重点需要明确IP环节中的实验阳性对照和阴性对照。对照组的设置是最关键的环节之一,控制变量是对照组设置的重要原则,在IP-MS实验设计中亦是如此。阳性对照的目的...
CO-IP后做质谱实验分组的设计 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法。免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法,通过使用诱饵蛋白(IP中的抗原,bait protein)特异性抗体间接捕获与其结合的...