IP：全称immunoprecipitation，即免疫沉淀，这一步主要是为了纯化富集目的蛋白。Input：全细胞裂解液，含有细胞内所有的蛋白，可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液，在做IP实验之前，需要先跑WB，确认样本中含有蛋白A和蛋白B。Anti-A：A蛋白的免疫共沉淀抗体 IgG：Anti-A的同型对照抗体，即跟Anti-A同...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。 原理 其原理是如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接的相互作用时,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的...
说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP(免疫沉淀)了:IP是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行亲和纯化的方法。基本原理是抗原-抗体特异性结合,检测目的是富集分离蛋白。 Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋...
免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation, Co-IP or CoIP)是研究体内蛋白质-蛋白质相互作用以及建立蛋白间相互作用关系的有力工具,是经典的在生理条件下利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体,能够特异性富集所研究的目的蛋白及其结合蛋白的一项技术,是确定蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 Co-IP实...
外源性 Co-IP：研究经过转染介导的外源表达系统来表达的蛋白质。2 操作步骤与结果分析Co-IP 实验流程图 2. Co-IP 实验流程图[1][5]。Co-IP 流程 (以内源性 Co-IP 为例)[1]1样本准备采用适当的方法收集细胞，使用含有合适的蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液裂解细胞。2固相介质准备将含有保护液的蛋白 A/G 磁珠...
🔬 免疫共沉淀(Co-IP)简介: 免疫共沉淀是一种利用抗体与抗原之间的特异性免疫反应来研究蛋白质间相互作用的方法。🔍 基本原理: 在细胞裂解液中加入抗原特异性抗体,通过免疫沉淀反应形成免疫复合物。经过纯化、洗脱后,可以通过SDS-PAGE电泳、Western blot或质谱鉴定出与抗原相互作用的蛋白质。🌈...
4、可与我司Co-IP实验进行衔接，整个实验可以畅通且快速地完成。实验周期 5-10个工作日 样品接收标准 客户下单及项目信息填写 在我司官网http://plant.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照提示填写项目名称、选择项目类型、项目所需要的具体信息，价格由系统自动计算。实验信息 在实验开始、结题关键节点系统会自动...
由上图中可以看到,蛋白A带有Flag标签,蛋白B带有Myc标签,该实验为利用标签蛋白来沉淀和检测目的蛋白;该Co-IP实验样本分为三组,第一组仅存在protein A-Flag蛋白,第二组仅存在protein B-Myc蛋白,第三组同时存在protein A-Flag和protein B-Myc蛋白(实验组);图中共有三组胶图,分别是Input组,IP组,以及Co-IP组。
蛋白质A/G琼脂糖磁珠是一种常用于Co-IP实验的材料,能够特异地结合免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白A(IgA)。在开始Co-IP实验前,需要预清洗蛋白质A/G琼脂糖磁珠。 1.将蛋白质A/G琼脂糖磁珠分配到各个离心管中,每个离心管中加入适量的洗涤缓冲液(通常为PBS或TBST)。 2.用转磁器将蛋白质A/G琼脂糖磁珠与洗涤缓...