其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用，是研究蛋白质互作的经典方法。特异性抗体捕获样品中的靶蛋白，形成抗体-靶蛋白复合物，然后利用能够与抗体结合的珠状支持物（例如Nanoab-Agarose）来固定和沉淀复合物，同时与靶蛋白相互作用的蛋白也会被沉淀下来，最后洗...
特异性抗体捕获样品中的靶蛋白,形成抗体-靶蛋白复合物,然后利用能够与抗体结合的珠状支持物(例如Nanoab-Agarose)来固定和沉淀复合物,同时与靶蛋白相互作用的蛋白也会被沉淀下来,最后洗去与靶蛋白相结合的非特异性蛋白,再通过SDS-PAGE进行分析、Western blot检测得到我们要验证的结果。因此,Co-IP的实验步骤可大致概括...
Co-IP—验证蛋白互作的不二之选 蛋白互作在细胞生命活动中起着至关重要的作用,并在不同的时空层面上参与多种细胞活动,因此研究蛋白互作对于理解分子调控网络至关重要。而在植物中筛选到潜在的互作蛋白后,大多数情况下,获得表达两种蛋白的稳定转化植株费时又费力。在这种情况下,如果不需要非常严格地在植物体内研究两个...
● 通常可从两百万个细胞中提出200-500µg胞浆蛋白和100-200µg核蛋白(浓度1mg/mL) ● 经过多种哺乳动物细胞与组织验证 ● 兼容下游IP/co-IP, EMSA, Pull-down实验* *小贴士:为确保下游互作实验不受干扰,建议对所得蛋白进行稀释或透析,以降低溶液中的离子强度。 如果需要提取具功能活性的膜蛋白来进行IP...
免疫共沉淀(Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用,是研究蛋白质互作的经典方法。特异性抗体捕获样品中的靶蛋白,形成...