由于IP的抗体用量非常大(1ug),就导致55KD处的信号会非常强。如果你用抗兔的二抗进行显色,那么55KD处的ip抗体的重链和你的目的蛋白会重叠在一起,无法分辨。 然而这个时候如果你的目的蛋白进行WB的抗体不是兔抗的,比如小鼠抗的,那么就需要用抗小鼠的二抗...
说明书(CO-IP26149)Pierce免疫共沉淀(Co-IP)试剂盒 26149 2181.6 描述26149 Pierce 免疫共沉淀(Co-IP)试剂盒,包含⾜够进⾏ 50 次免疫沉淀反应的试剂(每次使⽤ 25ul 树脂固相化抗体)试剂盒组分:加强型AminoLink偶联树脂,2 mL 固相树脂以50%的浆液形式提供(例如,100ul 50%的浆液含有50ul固相...
TrueBlot®蛋白A磁珠IP/Co IP试剂盒可实现高效免疫沉淀(IP)以及使用少量抗体(通常为1-10µg)对抗原进行共免疫沉淀(co-IP)。Rockland/艾美捷该试剂盒用于蛋白质、蛋白质复合物、蛋白质核酸复合物和蛋白质的免疫沉淀其他抗原。将特异性抗体添加到样本中以形成免疫复合物。免疫系统然后,复合物与蛋白质A磁珠结合。清...
本操作流程可以根据需要按比例调整;参见―重要产品信息‖的表1 中抗体和树脂的建议用量。 1将加强型AminoLink偶联树脂和试剂平衡至室温。 2用超纯水稀释20交联缓冲液至1,每个IP反应准备2 毫升1×交联缓冲液。 3轻旋加强型AminoLink偶联树脂的瓶子,以获得均一的悬浮液。使用大口径或截短枪头将50ul树脂浆液加入...
1ul。根据查询丁香园论坛得知,coip抗体1ul抗体对应1mg蛋白,所以一定要定量,才能确定IP时加入抗体的量。
本操作流程可以根据需要按比例调整;参见―重要产品信息‖的表1中抗体和树脂的建议用量。 1将加强型AminoLink偶联树脂和试剂平衡至室温。 2用超纯水稀释20交联缓冲液至1,每个IP反应准备2毫升1×交联缓冲液。 3轻旋加强型AminoLink偶联树脂的瓶子,以获得均一的悬浮液。使用大口径或截短枪头将50ul树脂浆液加入Pierce...
Flag-Tag免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒,包含足够完成 40 个反应的试剂,每个反应使用25 µL凝胶。能够高效完成抗原免疫沉淀(IP及免疫共沉淀(Co-IP)实验,抗体用量小于10μg且无需离心。 试剂盒中提供Anti-FlagAffinity Gel可以实现高效快速的抗原分离。免疫沉淀试剂盒配有经过优化预制的缓冲液,为免疫沉淀实验提供了最佳...
IP样本一般建议新鲜制备并立即使用,如有需要可保存在-80 ℃。 2)预纯化 阴性对照的选择: 与IP抗体同源同型(亚型)的抗体:如 Rabbit IgG;Mouse IgG1, etc; 取与IP实验等量的裂解液,使用Isotype Control孵育;与IP抗体孵育同时进行。 Isotype Control选择: ...
CO-IP(免疫共沉淀)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 从原理示意图可见,免疫共沉淀利用抗原 (红三角) 与蛋白 (蓝圆柱) 的特异性结合,再通过连接着树脂的抗体 (紫圆球) 去识别抗原,从细胞裂解液或者蛋...