方案三:标签类(Flag,HA,GFP,myc等)IP通过过表达方式,将目标IP蛋白带上Flag,HA,GFP,myc等标签,可极大方便后续的实验检测。 ①可直接选择现成的Flag beads或者磁珠,IP实验会比较容易操作,由于标签抗体非常成熟,IP抗体与WB抗体选择不同种属来源,即可避免轻重链问题。 ②WB选择直接HRP标记的标签抗体(如Flag-HRP mab)...
内源性 Co-IP 实验可选择蛋白 A/G 磁珠或蛋白 A/G 琼脂糖;外源性 Co-IP 实验中蛋白携带标签 (如 Flag、HA、c-Myc、GST 等),可以选择标签抗体类磁珠/琼脂糖凝胶珠 (如 Anti-Flag 磁珠、Anti-HA 磁珠、Anti-c-Myc 磁珠、Anti-GST 磁珠等),可一定程度增强丰度,减少 IgG 干扰。 Co-IP 结果解读 随着C...
方案三:标签类(Flag,HA,GFP,myc等)IP通过过表达方式,将目标IP蛋白带上Flag,HA,GFP,myc等标签,可极大方便后续的实验检测。 ①可直接选择现成的Flag beads或者磁珠,IP实验会比较容易操作,由于标签抗体非常成熟,IP抗体与WB抗体选择不同种属来源,即可避免轻重链问题。 ②WB选择直接HRP标记的标签抗体(如Flag-HRP mab)...
内源性 Co-IP 实验可选择蛋白 A/G 磁珠或蛋白 A/G 琼脂糖;外源性 Co-IP 实验中蛋白携带标签 (如 Flag、HA、c-Myc、GST 等),可以选择标签抗体类磁珠/琼脂糖凝胶珠 (如 Anti-Flag 磁珠、Anti-HA 磁珠、Anti-c-Myc 磁珠、Anti-GST 磁珠等),可一定程度增强丰度,减少 IgG 干扰。 Co-IP 结果解读 随着C...
在蛋白生物学的世界里,Co-IP 是解锁蛋白质“朋友圈”的神兵利器。但如果操作不当,它可能会变成实验室里的“尴尬社交”。今天,我们就来聊聊如何让你的 Co-IP 实验优雅又高效,轻松把蛋白“拉下场”! 01 什么是 …
如果想探索细胞内蛋白质相互作用的奥秘,免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation ,Co-IP)是必备的关键工具。通过特定抗体的作用,我们可以捕捉并研究蛋白质之间的相互作用,揭示细胞信号通路中的重要细节。 本文将聚焦Co-IP实验标准操作、结果图解读、21个常见问题分析&解决、实际应用场景等,帮助大家更好的掌握免疫共沉淀技术。
辉骏生物提供的Co-IP免疫共沉淀服务分为以下两种: 1.Co-IP WB,用于检测某样本中的诱饵蛋白和待测蛋白是否存在相互作用; 2.Co-IP MS,用于筛选某样本中的诱饵蛋白与哪些蛋白具有相互作用。 Co-IP(免疫共沉淀)检测服务 加技术专员微信了解Co-IP实验周期、优惠等 ...
IP-MS不仅可以用于验证已知的相互作用的蛋白,还可以用于寻找能与目的蛋白相互作用的未知的蛋白质分子。2、实验步骤 IP-MS的实验流程如下图所示,包括:(1)材料获取:细胞或组织。(2)蛋白提取:可根据目的蛋白的特性加入不同类型的IP裂解液及抑制剂。如:非磷酸化蛋白可不添加磷酸酶抑制剂;IP背景高,选用裂解...
为了帮助大家更好的理解实验结果图,小远在这里对Co-IP实验结果图中常出现的一些名词进行一个解释。 Input:假设要验证蛋白A和蛋白B相互作用,那么前提是我们提供的细胞裂解液里要有蛋白B和蛋白A,如果没有,那这个实验就没有意义了。那怎么证明细胞裂解液里有蛋白A和B呢?很简单,直接取细胞裂解液做蛋白A和蛋白B的WB...