以核糖体RNA14S(RibS14)为参考基因。所用引物为:RibS14(Forward5'-gaccttggctgaagga-3',Reverse5'-cagtaccccagatag TT-3')、HC恒定区(Forward5'-gcttttccagacacc-3',Reverse5'-catcagcatggagagaga-3')和LC恒定区(Forward5'-ctgttgcctgaat-3',Re...
目的通过RACE(RapidAmplification of cDNA Ends)技术获取HCMV-Towne病毒株的UL148基因相关转录本cDNA序列。方法将HCMV-Towne病毒株接种至生长良好的HFF细胞,待细胞出现病变后,取上清液,提取病毒DNA;应用多重PCR技术鉴定HCMV病毒;收集病变细胞,抽提病毒RNA;根据已知的部分cDNA序列,分别在其5'和3'端设计特异性引物,与5...
目的构建含TK自杀基因的质粒表达载体并进行转染研究.方法根据已发表的Hsv-TK基因的核苷酸序列,设计并合成一对引物,以含TK基因的PGEM/TK质粒为模板扩增出TK基因全长CDS序列,将其克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV中,进行序列分析和酶切鉴定后,运用电穿孔法将重组体 pCDNA3.1(-)CMV.CD转入鼻咽癌CNE-...
1.一种人巨细胞病毒(HCMV)荧光PCR检测方法,其特征在于包含两对特异性引物和两条特异性探针,扩增目标片段长度分别为91bp和160bp,序列为: 引物1:5`-ACCCTGTTCTTCCTCGCTAT-3`(Seq No.1) 引物2:5`-GCCCGAGCCCGACTTTA-3`(Seq No.2) 引物3:5`-CCAGTGAATTTCTCTTCCGTCT-3`(Seq No.3) 引物4:5`-CATAGA...
UL122基因PCR引物序列为:上游5’-CGGCTGTATCGTGATCTCTG-3’,下游5’-CAGGAGGAGGAAGACGAAGA-3’。内参照采用GAPDH,PCR引物序列为:上游5’-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3’,下游5’-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3’。结果显示,与阴性对照组相比,siRNA表达质粒对UL122mRNA表达的抑制率为48.2%。 (4)流式细胞仪检测AD293...
根据建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV),齿兰轮斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)和黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)3种病毒外壳蛋白基因序列保守序列设计特异性引物,以病毒侵染的蝴蝶兰总RNA反转录的cDNA为模板进行扩增,建立了三重RT-PCR同时检测该3种病毒的方法.CymMV,ORSV和CMV 3种...
目的 研究抗人巨细胞病毒(HCMV)人源基因工程抗体.方法 采用噬菌体表面展示技术.首先从HCMV感染者外周血中分离淋巴细胞,提取RNA,逆转录后用特异性引物扩增轻,重链基因... 段涛,梁米芳,谷淑燕 - 《中华实验和临床病毒学杂志》 被引量: 10发表: 2003年 姜黄...
步骤(1)中所述的引物为: 引物名称 靶标 引物序列 F3outerprimer CMV TGATTCTACCGTGTGGGTG B3outerprimer CMV CGGCGTACTTTCTCATGTC FIPinnerprimer CMV GCGAACATAGCAGAGATGGCG_GACAGTCCGCAAAGTTCCTG BIPinnerprimer CMV CAGTATGCAGCATCCGGAGTC_CCGCATCGCCGAAAGATCA F3outerprimer PVY CGAAATCTGCGGGATGTGG B3ou...
CMV甜瓜分离物外壳蛋白基因的克隆及其生物信息学分析
目的建立检测人巨细胞病毒(HCMV)感染的套式PCR方法并探讨常见性病患者HCMV的感染情况.方法在HCMV IEA基因内自行设计两对引物,建立套式PCR检测688例常见性病患者及138名健康献血员血液HCMV-DNA,同时应用捕获ELISA检测HCMV-IgM.结果性病患者HCMV-IgM及DNA阳性率分别为34.74%和39.53%,与对照组(8.00%,10.14%)相比均...