3.1.5引物 表1:实验所需引物、引物序列及用途 构建策略 图1pCB301-Fny1-3Um和pCB301-Fny1-3Um-P200突变体构建 Fig.1pCB301-Fny1-3UmandpCB301-Fny1-3Um-P200mutantbuild 实验方法 3.3.1碱裂解法提取质粒单菌落LB液体培养基中37℃12h1)灭菌后牙签接种振荡 ...
目的建立检测巨细胞病毒污染的PCR检测方法,并制备检测试剂盒.方法采用TaqMan探 针,选择保守序列CMV-pp65设计引物,荧光定量病毒载量;对试剂盒进行敏感性,重复性和特异... 王卓莹,王缦,陈华,... - 《中国生物制品学杂志》 被引量: 6发表: 2008年 人巨细胞病毒感染对体外培养肺成纤维细胞中明胶酶的影响 目的探讨...
【方法】根据PRRSV的基因序列特征和CMV启动子的序列特征,对pBluescprictⅡSK(+)载体进行多克隆序列改造;设计特异性引物,分6段扩增,组装出PRRSV的全长cDNA并扩增CMV真核启动子序列;采用酶切,连接,转化等方法将连接成功病毒的全长cDNA置于CMV真核启动子序列的下游,获得含有CMV启动子和猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1A株...
以核糖体RNA14S(RibS14)为参考基因。所用引物为:RibS14(Forward5'-gaccttggctgaagga-3',Reverse5'-cagtaccccagatag TT-3')、HC恒定区(Forward5'-gcttttccagacacc-3',Reverse5'-catcagcatggagagaga-3')和LC恒定区(Forward5'-ctgttgcctgaat-3',Re...
套式PCR用于检测新生儿及随访CID患儿白细胞及尿中HCMVDNA.两对引物序列取自HCMVIEA基因区,第一对引物扩增721bp片段,第二对引物扩增167bp片段,后者穴居于前者之中,结果... 李芳秋,张理菁 - 《检验医学》 被引量: 0发表: 1995年 急性白血病患儿脑脊液PCR扩增HCMV-DNA的研究 应用多聚酶链式反应(PCR)扩增和洋...
黄瓜花叶病毒坏死型卫星RNA的cDNA克隆和全序列分析 从田间发生坏死病害的番茄病株中分离得到黄瓜花叶病毒TN分离物,经研究证实TN分离物带有1株坏死型卫星RNA(TN-SatRNA).利用已知CMV卫星RNA的两端序列作引物扩增并克隆了... 程宁辉,濮祖芹,方中达,... - 《中国科学:生命科学》 被引量: 1发表: 1997年 黄瓜花...
根据建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV),齿兰轮斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)和黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)3种病毒外壳蛋白基因序列保守序列设计特异性引物,以病毒侵染的蝴蝶兰总RNA反转录的cDNA为模板进行扩增,建立了三重RT-PCR同时检测该3种病毒的方法.CymMV,ORSV和CMV 3种...
目的通过RACE(RapidAmplification of cDNA Ends)技术获取HCMV-Towne病毒株的UL148基因相关转录本cDNA序列。方法将HCMV-Towne病毒株接种至生长良好的HFF细胞,待细胞出现病变后,取上清液,提取病毒DNA;应用多重PCR技术鉴定HCMV病毒;收集病变细胞,抽提病毒RNA;根据已知的部分cDNA序列,分别在其5'和3'端设计特异性引物,与5...
将pAdTrack-CMV-rHSG质粒和特异性引物送上海生物工程有限公司测序,结果显示通过RT-PCR获取的目的片段克隆入pAdTrack-CMV后与GENEBANK报道序列一致,测序序列号:03190125(ZHILI2)P1-CO4。 1:Marker;2:BglⅡ、EcoRV双酶切质粒; 3:pAdTrack-CMV-rHSG质粒图4 pAdTrack-CMV-rHSG 重组质粒的酶切鉴定 3 讨论 rHSG的抗细胞...
RNA 沉默是由双链RNA(dsRNA)引发的一种细胞内mRNA 特异降解现象, 即发生沉默的基因转录仍然正常进行, 而合成的mRNA 在细胞质中发生了序列特异性降解, 导致基因不能正常表达成蛋白质[5]。RNA 沉默技术的应用, 为我们提供了一条更为有效、安全的抗病毒新策略[6]。可通过将同一病毒不同株系或不同病毒的有效核酸...