本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO‑K1细胞系的筛选方法,主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中,构建重组表达质粒pcDNA3.4‑ShmEs。利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHO‑K1细胞,并使用抗生素G418进行筛选。试验结果表明,ShmEs基因...
CHO-K1细胞FADD是Fas/FasL系统的一个信号连接蛋白,通过传递凋亡信号,介导细胞凋亡。为了揭示FADD在牛卵泡发育过程中的调控作用,采用RT-PCR从牛卵巢组织中扩增FADD基因,将其cDNA终止密码子删除,采用定向克隆技术连接到带有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-Nl中,构建融合蛋白重组质粒,经BglⅡ/EcoR...
摘要 本发明属于生物技术构建领域,具体公开了一种重组人PCSK9蛋白在CHO‑K1细胞中的表达纯化方法,包括真核表达载体pCMV‑pcsk9‑His的构建,CHO‑K1细胞的转染,细胞培养,重组人PCSK9蛋白的纯化等步骤,其中重组人PCSK9蛋白的纯化采用亲和层析、尺寸排阻层析、阴离子交换层析三步,获得的重组蛋白纯度更高,更加利于...
价格:¥0 货号:CHO-K1/GPR43 产地:北京 点击询问我要采购 竭诚为您服务! BioVector NTCC典型培养物保藏中心 联系人:Dr.Xu, Biovector NTCC Inc. 电话:400-800-2947 工作QQ:1843439339 (微信同号) 邮件:Biovector@163.com 手机:18901268599 地址:北京 已注册详细...
s412中,取cho-k1细胞培养液,以2ml/min的流速流经平衡好的nisepharoseexcel树脂; s413中,用bufferⅰ继续平衡nisepharoseexcel树脂的流速为2ml/min。 优选的,上述重组人pcsk9蛋白在cho-k1细胞中的表达纯化方法,s421中,取120ml的superdex200prepgrade树脂,装配成尺寸排阻层析柱,柱高60cm,柱直径是16mm,用bufferⅲ平衡...
FADD,pAcGFP-N1,重组质粒,CHO-K1细胞FADD是Fas/FasL系统的一个信号连接蛋白,通过传递凋亡信号,介导细胞凋亡。为了揭示FADD在牛卵泡发育过程中的调控作用,采用RT-PCR从牛卵巢组织中扩增FADD基因,将其cDNA终止密码子删除,采用定向克隆技术连接到带有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-Nl中,构建融合蛋...
CHO-K1FactorXa为了构建一种能快速表达人EPO蛋白的真核表达系统,本研究运用的方法是构建基于TNF-α跨膜段(transmembrane,TM)的pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO真核表达载体.把构建好的载体瞬时转染CHO-K1细胞,用FactorXa消化TM-FactorXa-EPO融合蛋白,rhEPO从FactorXa位点处切割下来,达到高效表达和可控酶切.结果本研究构建...
本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHOK1细胞系的筛选方法,主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中,构建重组表达质粒pcDNA3.4ShmEs.利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHOK1细胞,并使用抗生素G418进行筛选.试验结果表明,ShmEs基因在CHOK1细胞中...
GPCR (G蛋白偶联受体),是细胞信号传导中的重要蛋白质,其拓扑构象为7次跨膜的受体。当膜外的配体作用于该受体时,该受体的膜内部分与G蛋白相互结合激活G蛋白,进而启动不同的信号转导通路并引起各种生物效应。构建一个GPCR过表达的稳定细胞系能够广泛用于筛选药物,研究各类疾病病因和发病机理。BioVector NTCC质粒载体菌...
CHO k1细胞表达载体目的 利用两种不同真核表达载体构建全人源抗白细胞介素33单链抗体c片段(IL-33 scFv-Fc)重组载体,转染中国仓鼠卵巢(CHO) k1细胞,筛选稳定高表达单细胞株以提高融合蛋白产量.方法 双酶切前期构建的重组质粒pcDNA3.1/SP-scFv-Fc,回收SP-scFv-Fc片段,插入载体PMH3EN中,构建PMH3EN/SP-scFv-Fc...