CHO-S细胞染色体数目和原始中国仓鼠细胞相似,但是CHO-S细胞中糖酵解和三羧酸循环中重要酶类的高水平表达表现为CHO-S产生最高的葡萄糖消耗速率,从而使得CHO-S细胞表现出较快的生长速率;Dhfr基因的敲除可能导致该细胞系细胞周期相关蛋白表达量下降,从而导致CHO-DG44生长...
除其他一些特殊的的因素外（如利用伽玛射线诱变CHO细胞，产生一种新的细胞系CHO-DG44，这些DHFR缺陷型菌株需要甘氨酸、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷才能生长），它们易于在规定条件下的大规模细胞培养中生长，并且允许进行人类生物仿制药的翻译后修饰，这些特性使 CHO 细胞成为强大的生物工厂。它们独特的有益质量特性组合使它们...
CHO细胞在悬浮培养中生长的适应性标志着动物细胞培养技术的模式变化，并最终为使用搅拌式生物反应器(STRs)大规模生产高达20,000 L的重组蛋白治疗药物铺平了道路。CHO-DG441983年，Urlaub和Chasin构建了一个完全缺失DHFR位点的CHO细胞系CHO-DXB11，DHFR缺陷CHO细胞无法正常生长。当转染的细胞用甲氨蝶呤叶酸(MTX)处理时...
DHFR(二氢叶酸还原酶)基因缺陷CHO细胞系缺陷型细胞系,之后加入筛选压力(转染GS基因的用蛋氨酸亚氨基代砜MSX,DHFR基因的用氨甲喋呤MTX)使成功转染入目标蛋白基因的细胞克隆得以生存,之后通过SDS-PAGE,流式细胞术确定高表达,高亲和目标蛋白的克隆,之后对高表达克隆...
因此,获得一个双等位DHFR基因完全敲除的宿主细胞成为一个需求。Chasin实验室先后通过化学诱变和伽马射线诱变,最终在1983年筛选出了双等位DHFR基因敲除的CHO宿主细胞,并命名为CHO-DG44。虽然和DXB11都属于DHFR基因缺陷型,但从谱系分枝来看,DG44和CHO-S更为接近。因为DG44细胞完全缺失了DHFR基因的活性,并且可以无血清悬浮...
CHO-S是CHO-K1驯化后的悬浮细胞,出现于1971年,可在生物反应器中大规模培养。 CHO-K1、CHO-DG44和CHO-S是工业生产中最常见的三种细胞系。甲氨蝶呤(MTX)是DHFR的拮抗剂,可增加DHFR的表达,使外源基因的拷贝数得到扩增和高表达。DGFR基因扩增系统是目前最常用的基因扩增选择系统。但该系统也存在一些不足,如该方法...
于1957年诞生,是早期CHO细胞的亚克隆,属于接近野生型细胞。但在1968年的突变分析表明,CHO-K1细胞缺乏甘氨酸生物合成的基因。因此其细胞系冷冻溶液的组成通常为50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO;培养基组成通常为Ham's F-12K+10% FBS+1%双抗。 2. 二氢叶酸还原酶营养缺陷突变细胞系(CHO-DHFR-) ...
非淋巴细胞可以高效表达抗体基因，最常用的是CHO/dhfr(中国仓鼠卵细胞/二氢叶酸还原酶)扩增系统。CHO细胞易于转化，可以进行悬浮培养、无血清培养和高密度发酵。人鼠嵌合抗体在此扩增系统中的表达量远高于亲本杂交瘤细胞在体外培养条件下的表达水平，可达100pg/(10细胞·d)。这种表达水平的工程细胞系在高密度发酵系统...
CHO-S是CHO-K1驯化后的悬浮细胞,出现于1971年,可在生物反应器中大规模培养。 CHO-K1、CHO-DG44和CHO-S是工业生产中最常见的三种细胞系。甲氨蝶呤(MTX)是DHFR的拮抗剂,可增加DHFR的表达,使外源基因的拷贝数得到扩增和高表达。DGFR基因扩增系统是目前最常用的基因扩增选择系统。但该系统也存在一些不足,如该方法...
行业内现在比较常用的,可直接用于药物研发的基因缺陷型CHO细胞系,大致为,GS(谷氨酰胺合成酶)基因缺陷CHO 细胞系,DHFR(二氢叶酸还原酶)基因缺陷CHO细胞系(例如:CHO-DUXB11,CHO-DG44)。 三)成功转染外源基因的细胞株如何评价? 我们将筛选标志,GS基因或DHFR基因与外源基因分别转染入GS(谷氨酰胺合成酶)基因缺陷CHO...