细胞培养条件CHO - K1 细胞的培养条件对电转染效率有着显著影响。合适的培养基成分、温度、二氧化碳浓度等都是保障细胞处于最佳状态的关键因素。在优化实验中，我们发现使用特定配方的培养基，并将细胞培养在 [具体温度] 和 [具体二氧化碳浓度] 的环境下，细胞的活性和对电转染的耐受性都有所提高。细胞密度细胞密度在...
因此，优化电转染条件对于提高转染效率和细胞存活率至关重要。二、电转染的基本原理 （一）细胞膜的电穿孔机制 电转染的核心原理是利用电场诱导细胞膜发生电穿孔。当细胞暴露在高电场中时，细胞膜两侧的电位差增大，导致细胞膜的脂质双层结构发生变化，形成暂时性的微孔。这些微孔的大小和数量取决于电场强度和脉冲时间等...
株的优劣及产量是生物药生产的根本,因此提升细胞转染效率对提升公司产品质量及产量具有重大意义,公司要求必须完成优化转染效率的任务.细胞株研发部部门的主要职责是保证公司各项目所需工程细胞株的构建工作,为保证各项目的顺利进行,必须建立好细胞构建技术平台,细胞转染技术就是平台建设的重点技术之一,因此优化转染效率工作...
CHO-K1细胞中基因瞬时转染的条件优化 目的:以CHO-K1细胞为宿主基因瞬时转染条件的优化.方法:以GFP(Green Fluorescence Protein)为报告基因,考察了DNA:PEI比例,DNA用量及血清的加入对CHO-K1细胞的转染效率... 杨淑梅,杨晓梅 - 《现代生物医学进展》 被引量: 20发表: 2009年 ...
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时CHO-K1细胞的电转染条件是: 对于0.2 cm电转杯,细胞密度为5x10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为150V, 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯,…
cells/mL；4）执行转染作业，最佳转染条件应根据具体情况进行优化，以下转染条件仅供参考使用；5）将摇瓶置于规定的环境条件下进行细胞培养。补料策略 订购信息 参考文献 [1] Optimisation of a simple method to transiently transfect a CHO cell line in high-throughput and at large scale （转自：东富龙）
生物学,细胞转染,动物体内转染,RNA干扰,基因沉默,基因敲除,ECL发光液使用Entranster-E电转液与Amaxa Nucleofector进行电穿孔时CHO-K1细胞的推荐程序设置(0.2 cm电转杯中100μl电穿液) 程序设置为U-023,DNA用量为2μg,细胞密度为5x10^6 cells/ml
3.取出培养基,每孔加入50μL混合物。 4.4-6小时后,去除转染混合物,加入含10% FBS的IMDM+Pro培养基。 5.5% CO2、37℃条件下孵育48-72h后检测基因表达。 图1:贴壁细胞转染 附录:显微镜下比较L2K和Sinofection分别转染的CHO-K1细胞 Sinofection L2K PDF下载...
Nucleofec换备或草文tor进行电穿孔时CHO-K1细胞的推荐程序设置（0.2 cm电转杯中100μl电穿液）...
CHO-K1细胞稳定转染和瞬转COS的问题 我最近一直在瞬转COS细胞分泌表达,上清一直没有表达,也浓缩过再做ELISA WB,都没有。时间挺长了,实在等不及了,就想稳定转染cho-k1细胞系,通过MSX来筛选,加压25UM的MSX,结果还不到两个星期,CHO全死了,不知道怎么回事。如果有表达的话,应该是分泌表达的,但是怎么我总是做不...