ChIP-Seq实验原理:示意图为Fig.1和Fig.2.在生理状态下,把细胞内的DNA与蛋白质交联(Crosslink)后裂解细胞,分离染色体,通过超声或酶处理将染色质随机切割,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,再通过反交联(Reverse crosslink)释放结合蛋白的DNA片段,最后测序获...
ChIP-Seq是一种检测细胞内蛋白/DNA互作组的高通量技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和DNA测序技术,对目的蛋白在特定细胞/组织内的互作蛋白/DNA,进行系统的检测和分析。该技术适用于目的蛋白在特定细胞/组织中的蛋白/DNA互作组数据检测,或用于不同遗传背景/实验条件下的互作组差异研究。因此,ChIP-Seq是研究细胞内蛋...
染色质免疫共沉淀测序(ChIP-seq)是研究表观遗传调控的重要手段之一,它广泛用于全基因组组蛋白修饰、转录因子和其他蛋白-DNA互相作用研究。ChIP-seq作为爱基百客的王牌产品,已用多篇项目文章证明实力。 组织水平的ChIP-seq技术需要使用超声/酶切打断交联的基因组片段,然后用特异性抗体富集含有目的蛋白结合的基因组片段,...
获取全基因组范围特定目的蛋白与DNA的互作信息。 抗体类型丰富: 具有多种商品化 ChIP级抗体,高效支持实验开展。 应用方向 组蛋白修饰 转录因子靶点检测 超级增强子鉴定 诺禾优势 1. 实验稳定 诺禾ChIP-seq可稳定获得全基因组范围内研究蛋白特异结合的DNA片段,分析组蛋白修饰及表观遗传修饰的信息。
解交联:洗脱得到抗体-目的蛋白-DNA复合物,去除非特异性结合的DNA片段,使用蛋白酶K/NaCl处理进行解交联,最后将DNA片段纯化回收。 验证:通过qPCR对ChIP结果进行验证。 高通量测序:准备好ChIP后的DNA样品用于ChIP-seq建库,质检及测序。 图3 染色质免疫沉淀ChIP-seq/qPCR实验流程。 图4 带标签的染色质免疫共沉淀流程图...
ChIP-Seq的目的是研究感兴趣蛋白在基因组上的结合位点,可以用来鉴定转录因子(transcription factor, TF)的结合位点或者转录后更广范围的组蛋白修饰(histone marks),一般与调控元件有关。 高通量测序(high-throughput sequencing ,HTS)2005年首次提出,平台包含了:二代测序Illumina/Solexa, Roche/454, SOLiD (ABI), Ion...
CHIP-SEQ 技术,即染色质免疫共沉淀与高通量测序相结合的技术。它是研究体内蛋白质与DNA 相互作用的有力工具,还可以用来研究转录因子与基因表达的关系。通过高通量测序,可以一次性得到目的蛋白在整个基因组上的结合分布,得到目的蛋白精确的结合位点以及结合基序等信息。ChIP-Seq 的原理:首先通过染色质免疫共沉淀技术(ChI...
比对的目的就是“推本溯源”,把我们的reads比对到参考基因组上,利用Bowtie2或这BWA看看我们过滤后的reads能匹配到基因组的什么位置。测序reads和基因组之间并非完全match上,中间会存在几个mismatch,有可能是因为测序错误,也有可能是存在变异位点。 三、Peak calling Peak calling用MACS寻找基因组中大量短读片段富集的区...