RT-qPCR先通过反转录酶将RNA逆转录成cDNA,然后利用qPCR技术对cDNA进行定量分析。RT-qPCR技术广泛应用于RNA表达水平的研究,如基因表达分析、病毒载量检测等。 RNA的荧光定量PCR引物要求与普通qPCR相同,但要特别注意因为扩增的序列为RNA反转录后的cDNA,因此扩增的序列不能包含内含子,只能设计在外显子上,因为成熟mRNA的...
说到这份实验protocol,那可是猫大老师用多年的实战经验总结出来的,猫大老师用宝贵的经验为你铺路,有没有感觉到学习的心又被点燃了呢?! 猫大老师简介 严谨务实、活泼可爱 个人简介:中国科学院上海生命科学研究院博士,现于上海交通大学医学院从事博士后研究工作。 擅长领域:主要研究方向为表观遗传与基因转录调控。 实验...
酸谈实验课程为大家分享8+热门实验protocol,包括反转录PCR、PCR引物设计、RNA抽提、RT-PCR、WB、Transwell、免疫组化图像分析、常用信号通路套路等。 1 反转录PCR 2 PCR引物设计 3 RNA抽提 4 RT-PCR 5 Western Blotting 5 免疫...
ChIP-qPCR显示,与WT相比,FL1/FL3-FLAG在细胞分裂相关基因上的富集度明显更高(图7A和7B),这验证了FLs与细胞分裂相关基因的染色质有关联。耐人寻味的是,FL1/FL3在根中的富集比在芽中更明显,尽管根中FL1/ FL3的丰度并不比芽中高。团队进一步研究了CRY2和蓝光是否影响FL染色质的结合,实验使用的是在黑暗中生...
The results of the in-house RT-qPCR assays analysis of data obtained from public miRNA-seq databases, miRNA-chip databases, and the scientific literature all supported upregulation of the expression level of miR-182-5p level in NSCLC. Moreover, the in-house RT-qPCR data supported the influenc...
The quantification of hepatitis C virus (HCV) is essential for the management of chronic hepatitis C therapy. We have developed a fully automated microfluidic RT-qPCR system for rapid quantitative detection of HCV RNA in human EDTA-plasma and serum, and
5. 通过 qPCR 对 ChIP 结果进行验证。 6. 准备好的 ChIP 后的 RNA-Seq定量分析介绍 RNA-Seq定量分析介绍 概要 背景介绍 分析思路 应用 常见问题 RNA-Seq简介 RNA-Seq:也叫全转录组测序,利用高通量测序技术对cDNA序列 进行测序,从而获得样品中RNA的信息:定量和定性。 定量:差异基因筛选、功能注释等 ...
若目的基因的表达量非常低,则可以最多加入 5 µg 的 Total RNA;否则,如果加入 RNA 量过高,可能会超出后续 qPCR 的线性范围。 3. 本试剂盒制备的 cDNA 产物仅适用于 qPCR 反应,不适用于进行长片段目的基因的 PCR 扩增。 4. 由于本试剂盒中不含有 gDNA 去除步骤,建议加入 No RT Control 反应步骤。若...
5.DNA纯化和分析：纯化DNA，并通过PCR、qPCR、ChIP-seq等方法分析DNA序列，确定蛋白质的结合位点。应用 ...