1.准备CFSE染料溶液。通常使用的浓度为5-10μM的CFSE染料溶液。可以将CFSE染料溶于合适的溶剂中,如无菌PBS(磷酸盐缓冲盐水)或DMSO(二甲基亚砜)等。 2.处理待染细胞。将需要染色的细胞分离出来,通常采用离心法获取细胞沉淀物。接下来,将细胞悬浮液转移到培养基中。 3.CFSE染料标记。将CFSE染料溶液与待染细胞混合...
CFSE染色方法弃上清加入1fbspbs液体重悬洗涤一次再用合适体积数目的1fbspbs重悬取出2106l的细胞悬液离心弃上清 细胞悬液置于离心管底部。离心管横放,将PBS滴加在靠近管口的管壁上。再将CFSE加在PBS滴上。维持离心管横向水平,拧上管盖,迅速垂直倒置离心管于涡旋器上涡旋。(可参考JOVE网上的CFSE标记视频) 步骤: 1...
本法采用荧光标记,染料浓度对结果的辨认会产生一定影响。且CFSE染色的细胞在被杀伤后可见荧光有轻微下降,可能与细胞死亡后胞内少量蛋白质流出胞体有关。选择脾脏贴壁细胞及脾脏细胞作为靶细胞,可以观察到相互的杀伤作用,对研究移植免疫的双向性有一定的参考价值,成为观察细胞间杀伤提供了有效的手段。通过体外实验证实,...
(54)发明名称一种PBMC的CFSE染色方法及其应用(57)摘要本发明公开了一种PBMC的CFSE染色方法所述方法包括以下步骤:S1,冻存PBMC的复苏:将PBMC冻存管融化、离心,弃去上清液,加入培养液重悬PBMC并计数;S2,PBMC的CFSE染色:调整PBMC的细胞浓度,量取一定体积的细胞悬液,加入CFSE染色液,染色5‑10min,再加入预冷的染色...
对于大多数免疫学研究,测量免疫细胞增殖是一个关键步骤,常用CFSE荧光染料法。正确的细胞分裂对免疫细胞很重要,因为它调节免疫反应的水平和特异性。例如,T细胞增殖以识别和杀死癌细胞,B细胞进行细胞分裂以产生特定的抗体。CSFE测定的总体前提是用绿色荧光染料CFSE染色细胞,这种染料进入活细胞并与体内的蛋白质稳扎结合,从而...
结论:建立了一种基于活细胞染料C FSE 染色的猪淋巴细胞增殖试验方法,该方法可以在单个细胞水平上有效地分析刺激后CD4+和CD8+细胞亚群的增殖水平,进而评价细胞免疫水平。[关键词] 猪淋巴细胞;细胞免疫;C FSE 染色;淋巴细胞增殖试验 A method for detecting porcine lymphocyte proliferation based on CFSE staining Z ...
本研究建立了一种基于活细胞染料 CFSE 染色的猪淋巴细胞增殖试验方法 该方法可以在单个细胞水平上有效地分析刺激后 CD4+和 CD8+细胞亚群的增殖水平 进而评价细胞免疫水平。6 滋g/mL、9 滋g/mL和 12 滋g/mL 的刀豆素 A (ConA)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色的猪外关键词 猪淋巴细胞 细胞...
目的:建立荧光活性染料CFSE以适宜终浓度标记体外培养的嗅鞘细胞的染色方法。方法:CFSE以2、5、10μM 3种不同终浓度标记原代培养的嗅鞘细胞,通过流式细胞术、台盼蓝染色和荧光显微镜,检测和观察CFSE染色的阳性细胞率、细胞活力、生长形态特点和增殖情况。结果:3种终浓度CFSE标记嗅鞘细胞的阳性标记率均>99%;2μM ...
两种荧光染料-CFSE与碘化丙锭染色方法检测细胞杀伤能力 目的:用CFSE,碘化丙锭两种荧光染料先后标记的方法检测小鼠脾细胞杀伤能力,并探讨其应用价值.方法:丝裂霉素处理Balb/C小鼠脾细胞经尾静脉致敏C57BL/6小鼠,7天后与未经处理的或地塞米松处理的C57BL/6小鼠的脾细胞比较杀伤能力.分离各组C57BL/6小鼠脾细胞作为.....