在免疫学研究中，CFSE常常被用于T细胞增殖和细胞毒性的检测。将T细胞用CFSE标记后，给予抗原刺激并培养一定时间后，通过检测T细胞荧光强度的变化可以判断T细胞的增殖情况。同时，也可以通过CFSE标记的细胞毒性实验检测CTL（Cytotoxic T Lymphocyte，细胞毒性T淋巴细胞）或NK细胞的细胞毒性。在肿瘤学研究中，CFSE也被用于研究...
CFSE的浓度国外报道从0.5uM~20uM都有,建议终浓度为2.5-5uM。浓度太低,细胞标记的荧光强度不够,太高了对细胞有毒性,且影响细胞增殖。标记孵育时要经常摇匀。 实验实例 1、分离CD4+T:Ficoll分离人外周血PBMC,CD14磁珠(Miltenyi)阴选其中CD14-细胞,CD4磁珠(Miltenyi)阳选CD4+T细胞,流式检测CD4+T纯度>98%(两步法...
If longer than 3 days, add IL-2 to the medium 最后跑出来的结果如下图,右边红色的线是control, 绿色的部分是激活的T细胞。每一次增殖,CFSE dye intense都会减少一半。 以上就是CFSE T细胞增殖实验了,是不是很简单呢? 科科。
1.揭示CFSE增殖峰异质性本质:通过对不对称分裂机制的理解,科研人员能够更深入剖析抗原特异性T细胞群体的内在异质性及其分化路径。 2.优化过继免疫治疗策略:精准测定包括不对称性在内的T细胞性能参数,将有助于指导设计和制备用于过继细胞疗法的理想T细胞群体。 3.梳理复杂交...
传统观点倾向于将这种现象归因于实验操作误差或CFSE的降解作用。然而,最新的研究揭示了这一问题背后的深层生物学机制:不对称细胞分裂,这为重新解读和理解T细胞增殖数据提供了一个很重要的基础。 不对称细胞分裂的核心概念如下: 1.非等同子代生成:不对称细胞分裂过程中产生的子细胞展现出不同的表型和功能特性,颠覆了细胞...
5.在适当条件下进行体外细胞培养或输注过继转移的细胞,这个步骤完全由实验的目的所决定。 6.收集细胞,如果有必要,继续用免疫表型抗体进行染色,可以用PE、PerCP或PE-Cy5搭配染色。 图9.11.3是T细胞增殖实验的示例 7. 设置流式细胞分析仪,...
CFSE试剂盒源自thermo，实验步骤如下：(提示：染色后，确保避光操作)接着，执行T细胞活化步骤，使用thermo的CD3/CD28 dynabeads激活T细胞。最终结果如图所示，红色曲线代表对照组，绿色部分表示活化的T细胞。每次增殖后，CFSE荧光强度会减少一半。这就是CFSE T细胞增殖实验的全过程，是不是非常简便呢？
ProImmune 的 ProMap® T 细胞增殖测定可用于鉴定引发辅助 T 细胞增殖并因此可能引起辅助 T 细胞免疫反应的表位序列。 与基于放射性胸苷掺入的传统测定不同,该测定利用强大的流式细胞术方法,能够准确测定增殖细胞的百分比和 T 细胞反应的详细表型,所有这些都显着提高了整体灵敏度。
求助CFSE检测T细胞增殖网友 1 最佳答案 回答者:网友 主要有四种,方法步骤如下 一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法 胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程,通过测定细胞的放射性强度,可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具...
一 实验所需材料 ▼ ▲ CFSE(#565082),两管,每管500ug 制备完毕的单细胞悬液 DMSO 1× DPBS 10% Fetal Bovine Serum (FBS) 15ml&50ml离心管 流式管 T细胞圈门分型所用的荧光标记抗体(可选) 二CFSE保存温度和溶解 保存:到货后避光保存在-20C条件下。DMSO溶解后,避光保存在-20C条件下,建议在3个月内使...