激发波长和发射波长:CFSE的激发波长通常在490-495nm之间,发射波长在515-520nm之间。 标记效率:指CFSE与细胞内蛋白质结合的比例。高标记效率可以确保细胞的荧光强度足够强,便于检测和追踪。 稳定性:CFSE标记的细胞在一定时间内应该保持相对稳定的荧光强度,以便进行长时间的实验观察。 细胞毒性:低细胞毒性的CFSE试剂盒可...
CFSE标记细胞最早于1990年被用于检测淋巴细胞的迁移,后来逐渐发现它能在体内和体外实验中很好的作为流式检测细胞增殖的示踪染料。CFSE对细胞没有很强的毒性,化学性质稳定,与蛋白质结合后不会再分离,也不会被细胞内的酶降解,只有在细胞增殖时,细胞内的CFSE才会...
CFSE 标记细胞及测定细胞增殖 以小鼠CD4 T 细胞为例 Buffer A:PBS+%BSA,过滤灭菌 分离小鼠脾细胞 MACS法分离小鼠 CD4+ T细胞 用buffer a 重悬细胞,细胞浓度为1*107 /ml 加入CFSE,终浓度为5 M 37度孵育10 min 补加含血清的1640 10 ml 冰上5min 1000 rpm 离心 5min 再加入含血清1640 10 ml,1000 rpm...
标记时间为 20 min 及以上时,标记率 基本为 100 % ;5 μmol /L 或 10 μmol /L 的 CFSE 标 记 15 min,细胞标记率即基本为 100 % ;CFSE 浓度 为 20 μmol /L 时,仅标记 5 min 就能使细胞几乎 100% 标记;CFSE 浓度 > 10 μmol /L,作用时间 > 15 min 时,...
CFSE(AbMole Cat#M5117)是一种荧光染料,具有较强细胞膜通透性,进入细胞后乙酸基团可被细胞内酯酶水解,丧失膜通透性,保持高荧光活性。此时的 CFSE 形成可激发荧光的蛋白复合物,不会脱离细胞,且不会影响邻近细胞。CFSE 标记 BMSCs 的细胞膜、细胞核及细胞质都带有绿色荧光,且标记细胞的形态不受...
boxy fluorescein diacetate succinimidyl ester ,CFSE )是一种可穿过 细胞膜的荧光染料,具有与细胞结合特异性的琥珀酰亚胺酯基团与具有非酶促水解作用的羧基荧光素二醋酸盐基团结合在一起可使CFSE 成为一种良好的细胞标记物[1]。CFSE 进入细胞后可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时,CFSE...
CFSE标记细胞及测定细胞增殖gThe latest revision on November 22, 2020CFSE标记细胞及测定细胞增殖以小鼠CD4 T细胞为例Buffer A: PBS+%BSA,过滤灭菌分离小鼠脾细胞MACS法分离小鼠CD4+ T细胞用buffer a重悬细胞,细胞浓度为1*10 /ml加入CFSE,终浓度为5 M37度孵育10 min补加含血清的1640 10 ml冰上5min1000 rpm...
荧光染料CFSE标记神经细胞的体外研究 邓逸凡,张鹏,王爱璐,陈钰,邓玉林,马宏+ (北京理工大学北京100081 )摘要:目的探究荧光染料CFSE对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y标记的理想条件和跟踪时限。方法采用0、1、2、5、10|_imol/L的CFSE标记SH-SY5Y细胞,与未标记的U87MG细胞共培养,在24、48、72h三个时间点分别用流...
CFSE 是一种可标记活细胞的荧光染料,具有较 强的细胞膜通透性。CFSE 进入细胞后,其乙酸基团 可被细胞内酯酶水解去除,丧失膜通透性,而具有很 高的荧光活性,被激发将发生绿色荧光。此时的 CFSE 能与细胞骨架蛋白形成可激发荧光的蛋白复 合物,该复合物不能脱离细胞,且不会污染邻近细 胞,使非标记细胞免受染料影响 ...
摘要:目的探讨影响CFSE标记细胞效果的多种因素。方法用不同配制时间、不同浓度的CFSE标记不同浓度的HL60细胞、 MCG803细胞以及人淋巴细胞。结果配制的CFSE在存放2年以后标记率下降12.32%;在10滋mol/L范围内细胞标记率与 CFSE浓度成正比;低浓度细胞的标记率比高浓度的更高;同等条件下HL60细胞的标记率高于MCG803细胞...