适用于CE-SDS还原电泳对B项目蛋白产品分子量异质性及纯度的检测。 职责: 操作人员: 严格按照规程要求进行操作。 岗位主管: 起草文件,并确保操作规程的准确性、技术内容的完整性及文件的及时更新; 监督标准操作程序是否与实际过程一致,资源是否满足要求; 培训,确保此操作规程的正确实施。 程序: 1术语解释 CE:
一、非还原CE-SDS-PAGE 原理:该技术结合了毛细管电泳(CE)的高分辨率与SDS-PAGE的蛋白质分离能力。在非还原条件下,蛋白质的二硫键不被破坏,因此可以保留蛋白质的天然构象或亚基结构。 应用:适用于分析蛋白质的分子量、纯度、电荷变异体及多聚体等特性,特别是在研究蛋白质复合物、抗体药物或其他需要保持完整结构的...
1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂 2非原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含不含还原剂 3还原性-CE-SDS检测关注轻重链、非糖基化重链含量比值上样缓冲液含还原剂 4非还性-CE-SDS检测关注完整的蛋白纯度上样缓冲液含不含还原剂 六、实验结果图 图1 SDS-PAGE电泳图 图2 毛细管电泳纯度...
表2. Agilent CE7100的参数设置 模式毛细管电泳 检测波长220nm, 带宽4.0nm 毛细管卡盒/支架盒温度25℃ 样品温度15℃ 电极入口正极,出口负极 进样 还原-5kv,20s 非还原-10 kv,30s 分离时间还原:30min;非还原:40min 4. 结果 积分处理:计算结果如下: Sample name非还原还原 Fraction%Main%LC%NGHC%HC%LC+HC%...
非还原ce-sds原理 CE-SDS原理是检测性反应,它是一种微观粒子性反应,是用电场将材料中分子和跨膜分子进行拆分的技术。它利用电场游动介质将材料中的分子电位拆分。当电场的强度超过分子的阈值,分子会被拆分并使其电中心被拆分开来。这种方法在微粒子检测中被广泛应用,可以在静电场中检测微粒子和生物分子,甚至可以...
CE-SDS(非还原) 仪器组成 毛细管电泳系统的基本结构包括进样、填灌/清洗、电流回路、毛细管/温度控制、检测/记录/数据处理等部分。 CE-SDS(非还原) 检测器 CE-SDS(非还原) 进样方式 1. 流体力学进样方式 (1)进样端加压 (2)出口端抽真空 (3)虹吸进样 进样量:毛细管长度的1%-2%;nL级、非常小; 2. ...
利用SDS-PAGE电泳方法或毛细管电泳法(CE-SDS),对蛋白(抗体、抗原)进行纯度分析,确保广泛分子量范围的各种蛋白质均可获得最佳的分辨和检测效果。 2、 实验样品要求 浓度大于0.5ug/ul,体积大于50ul, 含盐量不超过20mM 3、 项目内容 序号项目明细实验选择方法备注1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂2非原性...
CE-SDS法中,还原型CE -SDS系统适用性试验要求电泳图谱应与()相符。A.任意标准图谱B.实际测定的图谱C.提供的典型电泳图谱D.理论计算图谱点击查看答案&解析 手机看题 你可能感兴趣的试题 单项选择题 在分子排阻色谱法(SEC)中,()分子在色谱柱中滞留时间较长。 A.大于所有孔径的B.小于所有孔径的C.等于所有孔径...
只有SDS的叫非还原性SDS。变性与非变性同样的。 巯基乙醇 巯基乙醇从化学分子式的角度看巯基乙醇有α－巯基乙醇和β－巯基乙醇，但α－巯基乙醇不稳定。原因是羟基和巯基连在同一个碳原子上是不稳定的。在生物学中常说的巯基乙醇就是β－巯基乙醇。 2-巯基乙醇（又称为β-巯基乙醇）是一种有机化合物...
而SDS这种阴离子表面活性剂的加入,它能使蛋白质氢键、疏水键打开,并按一定比例与蛋白质分子结合成带负电的复合物,其负电荷远远超过了蛋白质原有的电荷,因而掩盖了不同种类的蛋白质间原有的电荷差别。这样就使电泳的迁移率只取决于分子量大小这一因素,从而达到分离不同组分的蛋白质的目的,并在还原剂巯基乙醇的存在...