SDS-PAGE:使用带有4-12% Bis-Tris凝胶和GelCode Blue染料的Invitrogen NuPAGE Mini-Gel电泳系统(Life Technologies)分析人源IgG抗体样品,并在45°C下热应激14天后再次分析相同的样品。样品用水稀释至0.2 mg/mL,再用4×Invitrogen NuPAGE LDS样品缓冲液(Li...
抗体药物纯度分析（CE-SDS、SDS-PAGE、SEC、RP等）抗体药物是一类通过人工合成的抗体来治疗疾病的药物，通过与目标分子特异性结合从而达到治疗的目的。常见的抗体类药物类型包括单克隆抗体、人工合成的抗体片段、免疫毒素、抗体药物共轭物等。抗体类药物在治疗多种疾病方面表现出显著的疗效，如癌症、自身免疫性疾病、炎症...
在纯度测定中,我们发现CE-SDS技术相比SDS-PAGE具有更高的分辨率,更适合用于分离正常和热应激处理的IgG样品。这两种方法在峰分辨率和信噪比方面存在显著差异。CE-SDS能够检测到非糖基化IgG,这是SDS-PAGE无法实现的。由于糖基化对IgG的功能至关重要,因此CE-SDS的这一独特分离能力使其成为此类应用的理想选择,特别是当...
因为这个方法也经常跑其他单抗项目的CE-SDS,NGHC和HC这种分子量只差几道尔顿的都能分离,SDS-PAGE得到的杂带比主条带都要差10道尔顿以上了,理论上对CE应该是能分离出来的。 针对第二个问题,我这边前处理条件都是一样的,仅仅是buffer不同,CE-SDS用的是贝克曼里面的buffer,SDS-PAGE的loading buffer是根据药典配的...
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非还原CE-SDS-PAGE(Capillary Electrophoresis Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)、还原SDS-PAGE以及SHS(通常可能指的是一种特定的分析方法,但在此为保持一般性我们不做具体定义)是生物化学和分子生物学中常用的三种蛋白质分析技术。它们之间主要存在以下区别: 一、非还原CE-SDS-PAGE 原理:该技术...
由于蛋白质分子的质量和形状不同,SDS的结合也有所不同,因此一般情况下,SDS与蛋白质的比例是一个近似值,这也使得SDS-PAGE成为蛋白质分析和鉴定的重要方法之一。 2. 毛细管电泳 毛细管电泳是利用电场作用下分离样品的方法。毛细管的直径非常小(通常为25-200μm),因此可以分离比分子量相近的蛋白质。样品通过电场移动...
1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂 2非原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含不含还原剂 3还原性-CE-SDS检测关注轻重链、非糖基化重链含量比值上样缓冲液含还原剂 4非还性-CE-SDS检测关注完整的蛋白纯度上样缓冲液含不含还原剂 六、实验结果图 ...
1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂 2非原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含不含还原剂 3还原性-CE-SDS检测关注轻重链、非糖基化重链含量比值上样缓冲液含还原剂 4非还性-CE-SDS检测关注完整的蛋白纯度上样缓冲液含不含还原剂 六、实验结果图 ...
1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂 2非原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含不含还原剂 3还原性-CE-SDS检测关注轻重链、非糖基化重链含量比值上样缓冲液含还原剂 4非还性-CE-SDS检测关注完整的蛋白纯度上样缓冲液含不含还原剂 六、实验结果图 ...