调整细胞密度为1×106 cells/ml,每2 - 3天换液。 Day7-10:再次使用CD3/CD28激活剂刺激CD8+T细胞,并保持细胞浓度在1-1.5*10e6左右。 Day14:肿瘤细胞消化后终止洗涤,以5×105 cells/ml的浓度重悬于培养基中,并以1ml/孔接种于24孔培养板中,培养箱孵育过夜。 Day15:收集CD8+T细胞,计数细胞。对于所有共培养...
4.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法,其中步骤(b)使用封闭 系统流式细胞仪进行。 5.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法,其中在步骤(d)中,当表 达共刺激因子的CD8+T细胞的数量大于或等于预定的每毫升细胞数量时,进行冷冻。 6.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+...
为进一步明确衰竭性表型PD1是否仅表达于肿瘤浸润性CD8+T细胞表面,将荷瘤小鼠和正常小鼠脾脏研磨制成单细胞悬液,染色后流式分析。比较CD8+PD1+ T cell在不同组织部位分布。结果发现CD8+PD1+T cell主要存在于肿瘤局部,荷瘤小鼠脾脏中也有一定的分布,而在正常小鼠的脾脏中几乎不存在(图2)。
T细胞亚群检测试剂盒说明书 一:试剂盒组成: 二:标本制备: 取肝素抗凝(25μl/ml)的静脉血1~2ml,PBS稀释1-2倍后,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层,保持两种液体界面清晰,离心(2000转/分)15-20分钟,吸取两液面交界处的单个核细胞层,加5倍PBS,离心(1000转/分)5分钟,弃上清液,沉淀即...
接下来,采用磁珠法提取并刺激CD8+T细胞。首先准备好提取buffer,按照比例计数PBMC,加入10e7个细胞进行buffer重悬。充分混匀CD8磁珠,加入细胞悬液中,冰上孵育15min。离心并弃去上清,重复步骤直至含激活磁珠的培养基制备完成。在第二阶段,充分混匀CD3/CD28磁珠,吸取磁珠加入EP管,并加入等体积的完全培养...
一种CD8+T细胞的分离制备装置专利信息由爱企查专利频道提供,一种CD8+T细胞的分离制备装置说明:本实用新型公开了一种CD8+T细胞的分离制备装置,包括箱体,箱体底部的四角处均固定连接有支撑腿...专利查询请上爱企查
1.一种用于治疗肺癌的CD8毒性T淋巴细胞的制备方法,其特征在于用人工抗原提呈细胞负载抗原肽后在体外高效活化用磁珠法分选HLA-A2阳性肿瘤患者外周血而来的CD8T细胞,CD8T细胞经激活,分化成具为具有杀伤肿瘤细胞的CD8毒性T淋巴细胞。 2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于通过果蝇细胞制备所述的人工抗原提呈细胞,通过...
结肠CD8+T细胞的多组学分析证实了UC的异质性和重塑性 为了在蛋白质水平上验证单细胞特征,作者接下来通过测序(CITE-seq)结合cell hashing技术,整合了另外9,062个细胞的转录和蛋白质组数据(图4A,B),制备了另外7个UC和5个健康样本。 发现scRNA-seq和随后的CITE-seq分析之间具有很高的重复性(图4B-D)。能够将效应细...
CD4/CD8+T细胞分选实验目的:分选CD4/CD8+T细胞,制备CART细胞材料及货号:15ml和50ml离心管,离心机,PBS,CD4磁珠,CD8磁珠,磁珠分选器,LS柱,TransAct T cell reagents,X-vivo培养基,FBS,双抗,血细胞计数仪,细胞计数仪,显微镜。方法及步骤:收集单个核细胞:离心结束后,小心吸取单核细胞层细胞(每管加入15-20ml细胞混悬...