为了防止冻融过程中免疫表位的损失,我们立即用以下一系列抗体对提取的PBMCs进行了标记:CD3 APC-H7、CD4 FITC、CD8 APC、CD45RA BV711、CCR7 BV650、PD-1 PE-Cy7、Tim-3 PE 和 FVS510 AmCyan(所有抗体均来自BD Biosciences公司,美国)。 在24小时内,我们利用流式细胞仪(FACS LSRFortessa,BD公司,美国)对细胞...
为了防止冻融过程中免疫表位的损失,我们立即用以下一系列抗体对提取的PBMCs进行了标记:CD3 APC-H7、CD4 FITC、CD8 APC、CD45RA BV711、CCR7 BV650、PD-1 PE-Cy7、Tim-3 PE 和 FVS510 AmCyan(所有抗体均来自BD Biosciences公司,美国)。 在24小时内,我们利用流式细胞仪(FACS LSRFortessa,BD公司,美国)对细胞...
图一. 新生小鼠脾脏细胞上图为新生小鼠脾脏细胞进行的CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC三色流式实验结果。从图中可以看出，在新生小鼠脾脏中，绝大部分细胞是不共表达的单阳细胞，其中约2/3为CD4+CD8-细胞，1/3为CD4-CD8+细胞。在成熟的T淋巴细胞中，CD4和CD8是互斥的两个指标，因此，在前期配色、后期调节补偿和数...
上图为新生小鼠脾脏细胞进行的CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC三色流式实验结果。从图中可以看出,在新生小鼠脾脏中,绝大部分细胞是不共表达的单阳细胞,其中约2/3为CD4+CD8-细胞,1/3为CD4-CD8+细胞。 在成熟的T淋巴细胞中,CD4和CD8是互斥的两个指标,因此,在前期配色、后期调节补偿和数据分析的时候,都不太容易出错。
其中,约2/3分化成CD4+细胞,1/3分化成CD8+细胞,在这个过程中,95%的细胞会发生凋亡。 4.经过阴性选择后,SP细胞成为成熟T细胞,通过血液循环进入外周免疫器官。 图二. 新生小鼠胸腺细胞 上图为新生小鼠胸腺CD4-FITC、CD8-APC的流式实验结果。从图中可以看出,在新生小鼠胸腺中,绝大部分细胞共表达CD4和CD8。 本期...
通常,我们会先检测CD3,来圈总T淋巴细胞,再分别用CD4抗体和CD8抗体,来区分CD4+ T淋巴细胞(辅助或调节性T细胞)和CD8+ T淋巴细胞(细胞毒性T细胞)。 图一. 新生小鼠脾脏细胞 上图为新生小鼠脾脏细胞进行的CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC三色流式实验结果。从图中可以看出,在新生小鼠脾脏中,绝大部分细胞是不共表达的...
接下来讲一下最基础的通过流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+和CD8+含量。实验步骤:1.取100μL全血加入30μL肝素钠溶液处理成抗凝血;2.取抗凝血100ul加入FITC anti-mouse CD3 Antibody(2μL)、APC anti-mouse CD4 Antibody(1μL)、PerCP/Cyanine5.5 anti-mouse CD8b.2 Antibody(1μL);3.避光孵育30min;4...
CD8:以细胞毒性 T 细胞 (CD8+ 初始 T 细胞)为靶标 CD4+CD25:以调节性 CD4+ T 细胞为靶标 Pan T 细胞:以所有 T 细胞为靶标 使用Dynabeads FlowComp 试剂盒分离的细胞明显比使用柱法分离的细胞更纯净、更有活力(图 1)。这些细胞保持其功能特性,适合直接用于流式细胞仪和任何下游...
CD3/CD8/CD45/CD4检测试剂(流式细胞法- FITC/ PE/ PerCP/APC),深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司,信息来源药智数据国产器械数据库。
接下来讲一下最基础的通过流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+和CD8+含量。 实验步骤 1.取100μL全血加入30μL肝素钠溶液处理成抗凝血; 2.取抗凝血100ul加入FITC anti-mouse CD3 Antibody(2μL)、APC anti-mouse CD4 Antibody(1μL)...