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一、产品说明产品名称小鼠脾脏CD4+T细胞专用培养基货号IMP-M196-1产品形态液体PH7.2-7.4货期现货培养基成分小鼠脾脏CD4+T细胞专用培养基细菌检测阴性真菌检测阴性支原体检测阴性细胞生长实验细胞生长良好,形态正常内毒素含量(EU/mL)≤10产品简介小鼠脾脏CD4+T细胞专用培养
1. 收集活化好的CD4+ T细胞,400g离心5min。用T细胞培养基重悬计数备用,在收集的过程中发现有些细胞会贴壁,此为正常现象,可反复吹打至贴壁的细胞也呈悬浮状态。 2. 另取一Anti-mouse CD3e和Anti-mouse CD28抗体包被好的24孔板,每孔加入2-5´105的细胞(若为96孔板,加入2´104细胞/孔)。若考虑长期表达目的...
4.配置各种分化培养基(用24孔板进行分化培养,每个孔加入1ml培养基) (1)Th1:10ml基础T细胞培养基,加入10ul IL-2,10ul IL-12,10.3ul IL-4抗体; (2)Th2:10ml基础T细胞培养基,加入10ul IL-2,10ul IL-4,11.5ul IFN抗体; (3)Treg:10ml基础T细胞培养基,加入10ul IL-2,10ul TGF-β; (4)Th17:10ml基...
小鼠初始CD4T细胞的Th1、Th2和Th17极化 该应用方案描述了可靠和高效的小鼠TH细胞分化的完整工作流程,从单细胞制备开始,然后分离初始CD4T细胞并体外激活和分化,通过综合细胞分析。 我们证明,在TexMACS™培养基中存在的体外TH细胞分化的各种TH亚群中特征效应细胞因子的表达水平高于RPMI1640。
(四)T细胞分化培养基制备(细胞房超净台) 1.磁珠分选前一天(也就是Day0)准备培养板,加入250ul anti-mouse CD3(2 µg/mL或3 µg/mL,用PBS稀释),37℃孵育2小时或4℃过夜包被。 2.配置T细胞基础培养基(50ml):48.5ml的1640完全培养基、0.5ml HEPES、0.5ml GlutaMAX、0.5ml丙酮酸钠、50ul 2-ME; ...
(四)T细胞分化培养基制备(细胞房超净台) 1.磁珠分选前一天(也就是Day0)准备培养板,加入250ul anti-mouse CD3(2 µg/mL或3 µg/mL,用PBS稀释),37℃孵育2小时或4℃过夜包被。 2.配置T细胞基础培养基(50ml):48.5ml的1640(血清)细胞培养基、0.5ml HEPES、0.5ml GlutaMAX、0.5ml丙酮酸钠、50ul 2-ME...
1. 收集活化好的CD4+ T细胞,400g离心5min。用T细胞培养基重悬计数备用,在收集的过程中发现有些细胞会贴壁,此为正常现象,可反复吹打至贴壁的细胞也呈悬浮状态。 2. 另取一Anti-mouse CD3e和Anti-mouse CD28抗体包被好的24孔板,每孔加入2-5´105的细胞(若为96孔板,加入2´104细胞/孔)。若考虑长期表达目的...
♦ 从供体小鼠分离naïve CD4+ T细胞并将其转移给受体小鼠 ♦ 肠道固有层单个核细胞的分离 ♦ 细胞内外分子的流式染色方案 ♦ 流式细胞术分析CD4+T细胞亚群 实验用Buffer MACS buffer(0.22 μM无菌滤器过滤,4℃保存) FACS buffer(4℃保存)
(4)利用以上三样试剂配制活化淋巴细胞培养基:解冻PMA、Ionomycin、Brefeldin A各一管。向180ul X-VIVO 15培养基中加入20ul 0.1mg/ml PMA(即PMA:培养基=1:10)。接着向15ml锥形管中加入4ml X-VIVO 15培养基,再加入刚才稀释好的PMA 4ul,再加入8ul 0.5mg/ml Ionomycin、8ul 5mg/ml Brefeldin A。这样配成...