采用威尼德电穿孔仪将重组载体转染至3T3细胞中。转染后的细胞在选择性培养基中培养至活率完全恢复，形成稳定的细胞池。利用流式细胞仪（FACS）筛选高表达CD34的细胞，进一步通过有限稀释法进行单克隆筛选，建立稳定转染的3T3-CD34细胞系。5. 目的蛋白表达检测 采用RT-PCR和FACS检测稳定转染细胞系中CD34基因和
细胞货号:2M-101D 中文名称:正常人骨髓CD34+造血干细胞 英文名称:Bonemarrow CD34+ cells,2 millioncells 细胞数量:≥2,000,000个/支 当使用配套的LONZA X-VIVO 15 系列无血清培养基时,本款人骨髓CD34+造血干细胞能呈现更好的细胞状态。 另外,当需要更为幼稚的细胞时,LONZA人脐带血CD34+造血干细胞将是更好...
1.分选得到的CD34+造血干细胞300 g离心5 min,用1 mL完·全培养基重悬后,取样计数,根据计数结果用完·全培养基重悬到105 cells/mL活细胞密度,接种到T25培养瓶或细胞培养板中培养。 2.3天后补液一次,调整细胞密度至2×105cells/mL,之后隔天补液调整密度至2×105cells/mL,培养时细胞密度控制在1.5×106cells/mL以内。
使用动员人单采血或脐带血,通过阳性选择分选试剂盒分离CD34+细胞。推荐使用Lymphoprep™(Stemcell, 07861)作为分离试剂,以及CD34 MicroBead Kit, human(Miltenyi Biotec, 130-046-702)进行细胞分选。 2.2 培养基的配制 SFEM II培养基(Stemcell, 09655)和StemSpan™ CC100(Stemcell, 02690)以99:1比例混合。 若添加...
细胞名称: CD34细胞, 小鼠杂交瘤细胞 种属来源: 小鼠 组织来源: 杂交瘤 疾病特征: 杂交瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 半贴壁生长 培养基: RPMI 1640,90%;FBS,10%。 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO...
北京泽平代理的LONZA人脐带血CD34+造血干细胞及培养基,供体来源丰富,本款冷冻保存的人脐带血CD34+造血干细胞,由单个健康供体的脐带血单核细胞(MNCs)通过阳性免疫磁性分离得到,并通过CD34+表达验证,可保证纯度≥90%。其所有细胞均不含有HIV-1和乙型肝炎,每个批次细胞均可提供质量分析报告。每支含有≥1,000,000个细...
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞 试剂和材料: 1. MSCs培养基; 2. 6孔培养板; 3. 丝裂霉素C,100μg/ml; 4. 共培养的培养基:IMDM添加10%FBS,100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素; 5. 细胞因子(干细胞因子,IL 饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞 ...
1.分选得到的CD34+造血干细胞300 g离心5 min,用1 mL完·全培养基重悬后,取样计数,根据计数结果用完·全培养基重悬到105 cells/mL活细胞密度,接种到T25培养瓶或细胞培养板中培养。 2.3天后补液一次,调整细胞密度至2×105cells/mL,之后隔天补液调整密度至2×105cells/mL,培养时细胞密度控制在1.5×106cells/mL以内...
二、细胞复苏操作: 1. 准备好 37°C 水浴; 2. 准备好培养基,温浴至 37°C; 3. 在超净工作台中,取 10m 培养基于 15mL 离心管中,待用; 4. 从液氮中取出含有细胞的冻存管,迅速将冻存管置于 37°C 温水中,并快速晃动冻存管,使其细胞悬液尽快融...
为深入研究造血干细胞(HSC)的生物学功能,根据表面标志,采用流式细胞仪分离和富集了小鼠骨髓中两类不同特征的HSC亚群c-kit+Sca-1+和c-kit+Sca-1-细胞。体外集落培养表明c-kit+Sca-1+细胞对IL-3或GM-CSF单独刺激无反应,而c-kit+Sca-1-细胞则可形成大小不等的细胞集落。多种造血生长因子[IL-3+IL-6+GM...