细胞增殖的检测方法众多,CCK-8是细胞增殖检测中的代谢活性检测,属于MTT的升级产品,操作较MTT更便捷(不需要DMSO溶解)。工作原理:CCK-8可以被细胞线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,间接反映活细胞
· CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 三、所需设备及仪器: 1. 10ul,100-200ul及多通道移液器 2. 酶标仪(带有450nm滤光片) 3. 96孔培养板 4. 二氧化碳培养箱 四、方法及步骤: 实验一:细胞增殖分析 1、制备细胞悬液:细胞计数。 2、接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数(约1...
CCK-8细胞增殖检测试剂盒基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),能快速灵敏地检测细胞增殖和细胞毒性。WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂…
2. CCK-8孵育。在细胞培养液中加入CCK-8试剂,10 μL/孔,轻轻震荡,混匀,继续培养。3. 吸光度值检测。CCK-8加入后不同时间点(0.5h,1h,2h),利用酶标仪检测450 nm处吸光度值(OD值),选取最佳OD值做统计分析。4. 实验结果计算公式:细胞存活率=[(实验孔-空白孔)/(阴性对照孔-空白孔)]×100% ...
第二,WST-8 产生的 formazan 比 XTT 和 MTS 产生的 formazan 更易溶解。第三,WST-8 比 XTT 和 MTS 更加稳定,使实验结果更可靠。第四,WST-8 和 MTT、XTT 等相比线性范围更宽,灵敏度更高,并且更加稳定。WST-8 对细胞无明显毒性。加入 CCK-8 溶液显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,检测时间更.....
CCK8 检测细胞增殖/ 毒性的原理、方法及注意事项 一、CCK8 检测细胞增殖/ 毒性的原理 Cell Counting Kit-8(简称 CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有 WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在...
细胞增殖实验是生命科学领域中常用的一种实验方法,用于研究细胞的增殖情况以及细胞增殖受到不同因素的影响。在细胞增殖实验中,MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)和CCK8(Cell Counting Kit-8)检测是常用的方法之一,可以用于定量测量细胞增殖的程度。本文将详细介绍MTT/CCK8检测(96T...
使用方法 1.以96孔板为例,96孔板中每孔接种100 μL的细胞悬液,在细胞培养箱预培养24 h。2.向每孔加入10 μL不同浓度的待测物质。如果仅测定细胞活性,则不需要2~3步骤,直接从第4步操作。3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(依据待测药物而定)。4.向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要产生...
CCK8检测细胞增殖/毒性的方法: 1.将处于对数生长期的各实验组细胞胰酶消化后,*培养基重悬成细胞悬液,并计数。 2.根据细胞生长快慢决定铺板细胞密度(多数为1000-2000 cell/well),每组3-5重复,每孔100-200μl培养基。根据实验设计决定铺板数量(如需要检测5天,则铺5张96孔板),我们以1000 cell/well,5复孔,200...
二、CCK8检测细胞增殖/毒性的方法 实验一:细胞增殖分析 1、制备细胞悬液:细胞计数 2、接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数,每孔约100ul细胞悬液, 同样的样本可做3个重复。 3、37C培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时,如果 不需要贴壁,这步可以省去。 4、加入10ul CCK8:由于每孔加入CCK8量比...