CCK-8检测法的原理基于水溶性四氮唑盐WST-8的还原反应。WST-8(化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2H-四唑单钠盐)在电子载体1-Methoxy PMS(磷酸甲萘醌)存在的情况下,可以被细胞内线粒体的一些脱氢酶还原,生成高度水溶性的橙黄色甲臜(formazan)产物。该产物的生成量...
图1. CCK-8检测原理图 CCK-8的优点 产生的甲瓒产物是水溶性的,无需换液,适合悬浮细胞 不需要放射性同位素和有机溶剂,对细胞的毒性小 CCK-8细胞活性检测试剂毋需预制,即开即用 灵敏度高,线性范围宽,数据可靠,重现性好 操作简便,省时省力 适合于高通量药物筛选 CCK-8的缺点: 与MTT法相比,CCK-8的价格比较...
大孔板(如24孔、6孔)调整接种量。 药物吸收考量:加药后,用CCK-8溶液测定450nm吸光度作为空白对照。 避免边缘干燥:培养板外圈孔加PBS,不用于测定。 待测物作用时间:根据性质和细胞敏感性,选择6-96小时不同作用时间。 换新鲜培养基:如果待测物有氧化或还原性,在加CCK-8前更换培养基。 显色时间:正常1-4小时,...
CCK8法的工作原理在于WST-8在细胞内被线粒体还原酶转化为橙黄色的甲臜（formazan）产生可溶性产物。这一过程与细胞的活性密切相关，活细胞数量越多，转化出的甲臜量也越高，因此可以通过测定光密度（OD值）来评估细胞的存活率和增殖能力。操作过程简单，只需将CCK8试剂加入到细胞培养液中，经过一定时间的孵育后，再使...
CCk8法原是一种分离纯化蛋白质的方法,它采用离心速度渐变离心的方式,通过梯度稀释来实现蛋白质的纯化。CCk8法主要包括三个步骤:准备梯度离心液、加载样品、离心和收集分离蛋白。 首先,准备梯度离心液。CCk8法的关键是通过离心速度渐变离心来实现纯化蛋白质。为了实现这一点,需要准备一种含有不同浓度的梯度离心液。一...
一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS...
Cell Counting Kit CCK8-细胞增殖与毒性检测实验原理及实验方法——CCK-8法 Cell Counting Kit-8，简称CCK-8，主要成份是四唑盐WST-8，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的formazan，其颜色深浅程度与细胞数量呈正比。因此，CCK-8试剂常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的...
CCK8法是一种简便、快速、准确的细胞增殖检测方法,其基本原理是利用活细胞内脱氢酶的还原作用,将WST-8还原为甲臜,通过测定生成的甲臜量来反映细胞的增殖活性。在实际操作中,只需经过细胞培养、细胞接种、添加CCK8试剂、孵育和测定吸光值等步骤,即可得到可靠的实验结果。因此,CCK8法在细胞生物学、药理学、毒理学等领...
本文将从CCK-8法的基本原理和步骤入手,深入探讨这一检测方法的应用和意义。 二、CCK-8法的基本原理 1. CCK-8试剂的组成和作用机制 CCK-8试剂主要由WST-8和辅酶Ⅰ组成。WST-8可被还原成橙色的水溶性甲烷化产物,其还原程度与细胞代谢活性成正比。辅酶Ⅰ促进WST-8的还原反应,增强反应敏感度。 2. 检测原理 ...
要理解CCK8法的原理,首先需要了解细胞活力的概念。细胞活力简单来说,就是细胞在特定条件下的生存和增殖能力。具有高活力的细胞能够正常代谢、分裂和发挥其特定的功能,而活力低的细胞可能处于受损、衰老或凋亡的状态。 CCK8试剂中的主要成分是水溶性四唑盐——WST-8。WST-8在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二...