1. 如果细胞起始的培养体积为200ul,则需加入20ul的CCK-8溶液,以此类推。 2. 建议每个药物浓度孔设置3个复孔,最后取均值做曲线。 3. 设计好实验对照,尽量排除其它因素的干扰: 1)空白对照:可以用加了等量细胞培养液、CCK-8溶液和药物但没有加细胞的孔; 2)阴...
各组的复孔数据剔除明显异常值后取平均值,按以下公式计算细胞存活率或细胞抑制率: As:实验组吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液) Ac:对照组吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液,不含药物) Ab:培养基吸光度(含培养基、CCK-8溶液,不含细胞、药物) 计算公式:细胞存活率=[(AS-Ab)/(AC-Ab)]x100%...
(1)接种细胞数:对于标准96孔板,贴壁细胞每孔最少需接种1000个细胞(100μl培养基)。若为白细胞,则每孔接种量不低于2500个细胞(100μl培养基)。若使用24孔板或6孔板,需预先计算每孔的适宜接种量,并确保每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。(2)药物吸收考虑:在细胞毒性实验中,需考虑药物吸收。为...
实验步骤解析 首先,将适量的细胞悬液加入96孔板中,并在细胞培养箱中培养至适宜密度。接着,根据研究目的向细胞中加入待测化合物或药物,并继续培养一段时间。之后,在特定时间点向每孔加入CCK-8试剂,并在细胞培养箱中孵育1-4小时。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度,以此评估细胞的增殖和毒性情况...
一、实验准备1. 准备实验所需试剂和设备,包括CCK8试剂、细胞、培养板、移液管、酶标仪等。2. 确定实验分组和样本数量,制定实验方案。二、细胞培养1. 将细胞接种于培养板中,根据实验要求设置不同的细胞密度和分组。2. 在细胞培养箱中培养细胞,根据细胞生长情况及时更换培养基和传代细胞。三、CCK8检测1. 在...
细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8法)是基于高度水溶性的四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)来进行测定的。WST-8在电子介体的作用下可还原生成水溶性甲瓒产物,产生颜色反应。CCK-8是非放射性的,可在细胞增殖和细胞毒性实验中,对活细胞进行灵敏的比色测...
🔬 CCK8检测细胞增殖的原理:CCK8试剂中的主要成分WST-8能够在细胞内脱氢酶的作用下被氧化还原,生成水溶性的橙黄色甲臜。甲臜的生成量与活细胞的数量成正比,因此可以通过测量甲臜的量来评估细胞的增殖情况。📌 注意事项1️⃣ 接种细胞时,细胞悬液必须充分混匀,以避免细胞沉淀导致每孔中的细胞数量不一致。通常...
【CCK8实验操作方法】一、实验原理CCK-8试剂是一种基于WST-8的细胞增殖检测方法,通过检测细胞增殖过程中产生的脱氢酶活性来反映细胞的生长情况。本实验旨在介绍CCK-8实验的操作方法,为科研工作者提供参考。二、实验步骤1. 细胞培养:将细胞接种于96孔板中,每孔加入适量培养基,放入培养箱中培养。根据实验需求,...
1. 🔬 首次进行实验时,建议先进行几个孔的预实验,以确定最佳的细胞接种数量和CCK-8试剂的加入时间。2. 💧 铺板时需确保细胞悬液均匀分布: 先在孔中加入50ul培养基,再接种50ul细胞悬液。 在接种过程中,不时地混匀细胞悬液,以防止细胞沉淀,导致每孔细胞数量不一致。每接种几个孔后,可以混匀一次。 铺板后...
CCK-8,作为一种广泛用于细胞增殖与细胞毒性研究的细胞生物学实验方法,其操作简便且效果显著。在实验过程中,只需将CCK-8溶液直接加入细胞样品中,无需繁琐的预先制备步骤。通过观察颜色的深浅,可以直观地判断细胞的增殖情况和毒性水平。颜色越深,表示细胞增殖越多,生长速度越快,同时毒性较低;而颜色浅则代表细胞...