CCK-8: (Cell Counting Kit-8),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。 基本原理:CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,颜色...
细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。 培养温度与细胞类型有关,一般哺乳动物细胞建议37°C,其他种属根据细胞培养条件选择合适的...
1、空白组(绿色):培养基; 2、对照组(粉色):培养基+细胞+PBS; 3、实验组(红色):培养基+细胞+待测样品; 4、白色孔加入100ulPBS或培养基,以缓解蒸发。 空白孔(不含细胞和待测物质的培养基,含有CCK-8) 对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8,不含有待测物质) 实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 计...
颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。可通过酶标仪检测 430-490 nm 处的吸光度 (OD 值),OD 值与细胞活力成正比,从而进行定量分析。CCK-8的检测灵敏度高于其他方法,如MTT,XTT,MTS或WST-1等。 ■实验验证 1---细胞毒性实验 为了验证筛选的 iZAK2 对衰老相关自身免疫的治疗作用,在小鼠原代 CD4+ T 细胞中检测了...
CCK-8试剂对细胞的毒性极低,因此部分其他细胞实验(如中性红法或结晶紫法)可在CCK-8法检测完成后继续进行。若处理细胞的药物为小分子且无吸光性,则可直接在450nm波长下测定吸光度。然而,若药物为纳米颗粒等有色吸收物质,为避免干扰,可先将孔板以1000rpm的转速离心3-5分钟,随后取80μl上清液置于新的空白...
🔬 CCK-8细胞毒性实验是生物学研究中常用的方法,用于评估药物或其他因素对细胞活力的影响。以下是实验的详细步骤和原理:1️⃣ 细胞准备:首先,将生长状态良好的细胞进行消化、离心和计数,确保细胞的活力。2️⃣ 铺板:将调整好浓度的细胞悬液均匀铺到96孔板中,每孔约3-5千个细胞,并设置4-6个重复孔。3...
CCK8法是一种基于WST-8的用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度、无放射性的比色检测法。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被活细胞线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,...
与其他方法比较,比色法具有操作简便、检测速度快等特点,适用于样本数量较多时的检测。目前常用的比色法细胞毒性测试方法如下表:三. LDH法与CCK-8法比较 从上表中可以看出,LDH法与CCK-8法都具有染料水溶性好、细胞毒性弱、操作简单、检测时间短等优点,适合快速、高通量检测,使用的染料也基本相似。那么,这...
1.种板细胞数: 细胞增殖实验:每孔加入约1000-2000个细胞,100μl培养基,每0,24,48,72h检测细胞的OD值。 细胞毒性实验:每孔加入约5000~10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。
CCK-8,英文全称是Cell Counting Kit-8。CCK-8试剂盒可用于简便而准确的细胞增殖和细胞毒性分析。 实验原理 CCK-8试剂盒中,最主要化学药品是WST-8【化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四...