CCK-8: (Cell Counting Kit-8),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。 基本原理:CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,颜色...
1.种板细胞数:细胞增殖实验:每孔加入约1000-2000个细胞,100μl培养基,每0,24,48,72h检测细胞的OD值。细胞毒性实验:每孔加入约5000~10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。2.检测方法在对应的检测时间...
2CCK8试剂盒检测细胞增殖的操作流程使用CCK8试剂盒检测细胞增殖,通常遵循以下步骤:首先,将细胞接种到培养板中;接着,培养细胞至贴壁;然后,向每孔中加入10ul CCK8与90ul培养基的混合液;继续培养数小时后,在预设的每个时间点检测各孔的吸光度。通过这种方式,可以快速且灵敏地评估细胞的增殖情况。②CCK-8 检...
1、空白组(绿色):培养基; 2、对照组(粉色):培养基+细胞+PBS; 3、实验组(红色):培养基+细胞+待测样品; 4、白色孔加入100ulPBS或培养基,以缓解蒸发。 空白孔(不含细胞和待测物质的培养基,含有CCK-8) 对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8,不含有待测物质) 实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 计...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)细胞检测方法是一种常用的细胞增殖和细胞毒性评估方法。该方法基于细胞代谢活力与细胞数量的关联,通过测量细胞对CCK-8试剂的还原能力来评估细胞的活力水平。此方法操作简便、快速,广泛应用于生物医学研究和药物筛选等领域。 本文将详细介绍CCK-8的工作原理、分析流程,并对其优缺点进行分析。
1.种板细胞数: 细胞增殖实验:每孔加入约1000-2000个细胞,100μl培养基,每0,24,48,72h检测细胞的OD值。 细胞毒性实验:每孔加入约5000~10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。 2.检测方法 在对应的检测时间点,...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
Cell Counting Kit-8,简称CCK-8试剂盒或CCK8试剂盒,是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒,可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
一、细胞增殖分析 1.培养细胞并将其接种到96孔板中。2.在37℃、5% CO2、90%湿度条件下培养24小时。3.配制不同浓度梯度的样本溶液,如300、100、33.3、11.1、3.7、1.2、0.4、0.14uM。4.每个浓度三个复孔加入到96孔板中,在37℃、5% CO2、90%湿度条件下培养适当时间长度。如6,12,24或48小时。5....
10μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24 小时内测定,吸光度不会发生变化。Q:用CCK-8测细胞活力时每次都要做标准曲线吗?建议每次做,虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样。对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。#细胞增殖# ...