1.种板细胞数：细胞增殖实验：每孔加入约1000-2000个细胞，100μl培养基，每0，24，48，72h检测细胞的OD值。细胞毒性实验：每孔加入约5000～10000个细胞，100μl培养基（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。2.检测方法在对应的检测时间...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
只能间接评估细胞数量:CCK-8细胞检测方法通过测量细胞对CCK-8试剂的还原能力来评估细胞的活力水平,而非直接计数细胞数量。因此,无法区分细胞增殖和细胞死亡的比例。在某些情况下,如细胞凋亡过程中,细胞数量可能不变或减少,但细胞代谢活力下降,可能导致结果的误判。 干扰因素:CCK-8试剂的还原反应可能会受到其他细胞因子、...
注:细胞活力指细胞增殖活力或细胞毒性活力。 注意事项 由于CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量,建议采用别的方法测定。 由于CCK-8 分析基于活细胞中脱氢酶活性的检测,因此影响活细胞中脱氢酶活性的...
1.种板细胞数: 细胞增殖实验:每孔加入约1000-2000个细胞,100μl培养基,每0,24,48,72h检测细胞的OD值。 细胞毒性实验:每孔加入约5000～10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。 2.检测方法 在对应的检测时间点,...
🔬 细胞增殖分析 制备细胞悬液:首先进行细胞计数,确保细胞数量准确。 接种到96孔板:根据实验需求,每孔加入约100ul的细胞悬液,细胞数量大约在1-2×10^4之间,每个样本可重复4-6次。 培养细胞:将96孔板放入37℃的培养箱中,细胞接种后大约需要4小时贴壁。如果不需要贴壁,可以跳过这一步。
Cell Counting Kit-8,简称CCK-8试剂盒或CCK8试剂盒,是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒,可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
CCK8细胞增殖曲线绘制。CCK8是细胞增殖表型hin重要的一个实验 原理:WST-8(四唑盐)是 CCK-8 的主要成分,呈粉色。在电子载体(1-Methoxy PMS)的作用下被线粒体中的脱氢酶还原为黄色甲臜类染料(Formazan),并释放到细胞外溶解在培养基中,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在 450nm 波长...
10μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24 小时内测定，吸光度不会发生变化。Q：用CCK-8测细胞活力时每次都要做标准曲线吗？建议每次做，虽然细胞是一样的，但是细胞的状态不一定一样。对于状态不一样的细胞，建议每次做标准曲线。#细胞增殖# ...
一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS...