CCK-8实验步骤窗体顶端 窗体底端 CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8 原理:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为...
2. 根据实验需求,在培养孔中加入0-10ul待测样本继续培养适当时间。如果是做细胞毒性试验,加入毒性物质后的培养时间需要摸索。要看毒性物质的性质和细胞的敏感性,一般要根据细胞周期来决定,起码要1-2代以上的时间。 3. 取10ul CCK-8溶液加入96孔细胞培养板,在37℃培养箱中继续孵育0.5-4小时。 4. 测定吸光度。
1.通常使用96孔板进行CCK8细胞增殖实验,将细胞消化重悬为细胞悬液,根据文献或前期实验确定的种板浓度,对细胞悬液进行稀释后每孔加入100μL细胞悬液,设置培养基组每孔加入100μL完全培养基,每组设置3-6复孔,周围一圈孔原则上不应作为样品孔,每孔加入100μL的PBS。 2.将96孔板放入细胞培养箱,继续培养12-24h至...
加CCK-8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入CCK-8试剂后轻轻震培养板。 ②加CCK-8试剂时间可分别在22h、46h、70h、94h时加入,也可以在24h、48h、72h、96h时再加入。重要的是需保证实验组和对照组在同一时间点进行实验。 ③若细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 发生变化,建议更换培养基后再加 ...
步骤:首先制作标准曲线(测定细胞具体数量);其次进行细胞活性检测;最后进行细胞增殖-毒性检测。注意事项:先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。 一. 制作标准曲线(测定细胞具体数量) 1、首先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。 2、按照比例(例如:1/2比例)...
一、实验准备1. 准备实验所需试剂和设备，包括CCK8试剂、细胞、培养板、移液管、酶标仪等。2. 确定实验分组和样本数量，制定实验方案。二、细胞培养1. 将细胞接种于培养板中，根据实验要求设置不同的细胞密度和分组。2. 在细胞培养箱中培养细胞，根据细胞生长情况及时更换培养基和传代细胞。三、CCK8检测1. 在...
（4）加入CCK-8试剂时微量不准确也可能导致结果偏差。为避免此情况，可以配制含10% CCK-8的培养基，以换液方式加入96孔板中，每孔加入100μl即可。计算方法 细胞抑制率 =（对照孔OD值 - 实验孔OD值）/（对照孔OD值 - 空白孔OD值）×100% 其中，对照孔指含有细胞、培养基和CCK-8的孔；实验孔指含有细胞、...
📝 实验步骤 取对数生长期细胞进行消化计数,调整细胞数量为1×106/ml,在6孔板中接种3滴/孔。每个组重复孔3个(也可以4个孔,一定要有备胎思维)。 24小时后进行小干扰、质粒、病毒转染、加药等处理。 如果是小干扰转染,6-8小时后转染换液。 48小时后,将细胞取出,按照2000个/孔铺入96孔板内(第一次做一定要...
4、CCK-8 的实验方法与步骤 应用场景一：细胞活性检测 1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，96孔板每孔加入 100ul， 使待测细胞密度为1,000～10,000细胞/孔。2. 5% CO2，37℃ 培养细胞 24 小时（培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少进行调整）。3. 每孔加入10ul CCK-8 溶液。如果...
CCK-8细胞实验是一种常用的细胞增殖和毒性检测方法。以下是详细的实验原理和步骤: 实验材料及试剂🧪 细胞:生长状态良好的细胞 96孔细胞培养板 CO2培养箱 酒精灯 移液器 酶标仪 CCK-8试剂盒 实验步骤📝 细胞准备:取生长状态良好的细胞,制备成一定浓度的细胞悬液。每孔加入100μl细胞悬液。对于细胞增殖实验,每...