三、实验步骤: 1.种板数:根据你摸索的,或者查阅文献确定你需要的种板浓度,根据种板浓度对细胞悬液进行稀释,通常细胞增殖实验每孔加入约1000-2000个细胞100ul,细胞毒性实验每孔加入约5000～10000个细胞100ul(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。 2.种板:以96孔板为例,96孔...
实验原理CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂,可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有水溶性的四唑盐WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行...
实验一:细胞增殖分析 1)制备细胞悬液,计数。 2)在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,同样的样本可做3个重复。 3)将培养板放入培养箱中预培养一段时间(37℃, 5%CO2),细胞贴壁需要大约2-4h,如果是悬浮细胞,该步骤可以省去。 4)每孔各加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔...
1. 细胞接种:将细胞均匀接种在适当的细胞培养板中,如96孔板。 2. 培养:将细胞在适宜的条件下培养,直到细胞达到适当的生长阶段或处理后的时间点。 3. 添加CCK-8溶液:按照说明书推荐的比例(通常为培养基体积的10%),向每个孔中加入CCK-8溶液。 4. 孵育:将孔板在37°C、5% CO₂的培养箱中继续孵育一定时间,...
CCK-8细胞实验是一种快速测定细胞增殖和毒性的方法，其原理是利用WST-8试剂被线粒体脱氢酶还原生成的甲臜产物颜色深浅与细胞活力正相关、与细胞毒性负相关。通过450nm波长下的OD值测定，可以反映活细胞的数量。实验主要应用于细胞增殖、毒性检测和药物敏感性测试等。实验步骤如下：根据细胞类型和实验需求，...
4. 添加CCK-8：此步骤有两种实施方式。一种是直接向每个孔加入10ul的CCK-8溶液；另一种是使用含10%CCK-8溶液的培养基进行换液处理。注意加入过程切忌产生气泡。5. 孵育CCK-8：加药后，将实验板置于37°C、5%CO2的细胞培养箱中，继续孵育1-4小时。该环节所需时间由实验者根据实际效果自行确定。6...
检测原理: ◆ Cell Counting Kit 简称 CCK8, (CCK-8/WST-8) 试剂盒, 是一种基于 WST-8(化学名: 2-(2-甲氧基-4-硝苯基) -3-(4-硝苯基) -5-(2, 4-二磺基苯) -2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 ◆ WST-8 属于 MTT 的升级产品, 工作原理为:...
CCK-8细胞实验，作为生物科学中的一项重要工具，其核心原理在于利用WST-8试剂的生物化学反应来评估细胞的增殖能力和毒性。在细胞内，WST-8通过脱氢酶的作用，转化为一种水溶性橙黄色的formazan，其颜色深浅与细胞活性成正比，颜色越深，代表活性越高，反之则越低。通过在450纳米波长下的吸光度测量（OD值）...