一、原理: CCK-8试剂盒用于快速灵敏地检测细胞增殖和细胞毒性。工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),可以被线粒体内…
WST-8是TT的升级品,其原理是在电子耦合试剂存在的情况下,可被线粒体内脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜(formazan)。颜色深浅与细胞的增殖呈正比,与细胞的毒性呈反比。酶标仪在450nm波长处测定OD值,间接反应活细胞数量。酚红和血清对CCK法的检测不会造成影响。实验步骤: 准备好细胞、96孔板、细胞计数板、200...
实验原理CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂,可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有水溶性的四唑盐WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行...
1. 细胞接种:将细胞均匀接种在适当的细胞培养板中,如96孔板。 2. 培养:将细胞在适宜的条件下培养,直到细胞达到适当的生长阶段或处理后的时间点。 3. 添加CCK-8溶液:按照说明书推荐的比例(通常为培养基体积的10%),向每个孔中加入CCK-8溶液。 4. 孵育:将孔板在37°C、5% CO₂的培养箱中继续孵育一定时间,...
4. 添加CCK-8:此步骤有两种实施方式。一种是直接向每个孔加入10ul的CCK-8溶液;另一种是使用含10%CCK-8溶液的培养基进行换液处理。注意加入过程切忌产生气泡。5. 孵育CCK-8:加药后,将实验板置于37°C、5%CO2的细胞培养箱中,继续孵育1-4小时。该环节所需时间由实验者根据实际效果自行确定。6...
CCK-8细胞实验是一种快速测定细胞增殖和毒性的方法,其原理是利用WST-8试剂被线粒体脱氢酶还原生成的甲臜产物颜色深浅与细胞活力正相关、与细胞毒性负相关。通过450nm波长下的OD值测定,可以反映活细胞的数量。实验主要应用于细胞增殖、毒性检测和药物敏感性测试等。实验步骤如下:根据细胞类型和实验需求,...
CCK-8实验步骤及原理 下载积分: 100 内容提示: 检测原理: ◆ Cell Counting Kit 简称 CCK8, (CCK-8/WST-8) 试剂盒, 是一种基于 WST-8(化学名: 2-(2-甲氧基-4-硝苯基) -3-(4-硝苯基) -5-(2, 4-二磺基苯) -2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
CCK-8细胞实验,作为生物科学中的一项重要工具,其核心原理在于利用WST-8试剂的生物化学反应来评估细胞的增殖能力和毒性。在细胞内,WST-8通过脱氢酶的作用,转化为一种水溶性橙黄色的formazan,其颜色深浅与细胞活性成正比,颜色越深,代表活性越高,反之则越低。通过在450纳米波长下的吸光度测量(OD值)...