6)向每孔中加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在加完试剂后轻轻晃动培养板以帮助混匀,或者直接配置含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入。另外注意,加样的过程中尽量不要产生气泡,以免影响OD值读数。 7)将培养板放入培养箱中孵育1-4h。因为细胞种类不同,...
CCK-8实验步骤窗体顶端 窗体底端 CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8 原理:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为...
CCK8实验 CCK-8实验 实验原理 CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂，可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8[化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的...
2. 接种细胞悬液:在96孔板接种细胞悬液,可做多个实验组,每组设置4-6个复孔,同时设置空白组,然后将细胞置于37℃ 5%CO2细胞培养箱中培养12-24 h; 3. 加入CCK-8:两种方法,每孔直接加入10ul的CCK-8溶液,或者配置成含10% CCK-8溶液的培养基以换液的形式加入,注意加入过程中避免产生气泡,可以将枪头浸入培养液...
(3)可能是在换液过程种没有将孔内的液体洗净就加入了新的培养基。 (4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% ...
(3)可能是在换液过程种没有将孔内的液体洗净就加入了新的培养基。 (4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% ...
简化的CCK8实验。 https://www.bilibili.com/video/BV1Hy4y1y7Zg/?spm_id_from=333.337.search-card.all.click 09 举个栗子 研究肺癌的S基因。 研究组:sh-S基因,sh组。 对照组:NC-S基因,NC组。 1.养细胞:分成两组,sh组、NC组。 2.在显微镜下观察细胞生长状态,细胞生长密度...
1. 如果细胞起始的培养体积为200ul,则需加入20ul的CCK-8溶液,以此类推。 2. 建议每个药物浓度孔设置3个复孔,最后取均值做曲线。 3. 设计好实验对照,尽量排除其它因素的干扰: 1)空白对照:可以用加了等量细胞培养液、CCK-8溶液和药物但没有加细胞的孔; ...
1. 如果细胞起始的培养体积为200ul,则需加入20ul的CCK-8溶液,以此类推。 2. 建议每个药物浓度孔设置3个复孔,最后取均值做曲线。 3. 设计好实验对照,尽量排除其它因素的干扰: 1)空白对照:可以用加了等量细胞培养液、CCK-8溶液和药物但没有加细胞的孔; ...
实验流程和操作步骤 01 实验分组(每组建议3-6个复孔) 实验组:药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂(见下表黄色列) 对照组:不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂(见下表绿色列) 空白组:不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂(见下表蓝色列) PBS孔:灰色,防止液体过度蒸发 ...