1、首先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。 2、按照比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。 3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标...
金属对CCK-8显色有影响。当终浓度为1Mm的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10 Mm的话，将会100%抑制。23、CCK-8试剂的保存条件？在避光条件下CCK-8试剂在 4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话，推荐在-20℃下保存。但是CCK-8若反复解冻和冰冻将会增...
为了验证 poly (I:C) 预处理在体外抑制炎症反应和凋亡细胞死亡,用 CCK-8 法检测 H9C2 细胞中不同复氧时间和不同 poly (I:C) 浓度下的细胞活力,结果表明 poly (I:C) 预处理显著抑制了糖氧剥夺 (OGD) 诱导的炎症和凋亡反应来限制细胞死亡。 ■ 实验验证 3---细胞增殖测定 吞噬死亡细胞对于维持组织内稳态...
CCK-8检测细胞活性 (2)收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100 μL ,铺板使待测细胞调密度至1000~10000/孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。 (3)5% CO2,37 ℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入100 μL上述稀释好的浓度梯度的RA,每个浓度设置五个空白对照,并设置细胞空白孔和培养基空白孔。 (4)5...
CCK-8实验步骤 1、在96孔板中配置100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。 2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。 3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。 4、向每孔加入10μl CCK8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
图1:WST-8 反应 图2:CKK-8原理 实验步骤 👉取生长状态良好的细胞制备成一定浓度的细胞悬液,每孔100ul加入96孔细胞培养板中。贴壁细胞,需37℃预培养2-6小时等细胞贴壁后开展实验,悬浮细胞不需要预培养。 👉依据实验需求,培养孔中加入0-10ul待测样本继续培养适当时间。细胞毒性试验,加入毒性物质后的培养时间...
①将悬浮细胞计数,梯度稀释7到~11个浓度后以100 μL/孔接种到96孔板中(384孔板为100 μL/孔)。 ②每孔加入10 μL(加入量为培养基的10%)的CCK8试剂(注意不要产生气泡,会影响OD值的读数),37℃ 5%CO2孵育1~4小时。 ③用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度。(如...
2. 按比例 ( 例如:1/2比例 ) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做 3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。 3. 接种后培养2-4 小时使细胞贴壁,然后加 CCK-8试剂培养一定时间后测定 O.D值,制作出一条以细胞数量为横坐标 (X轴) ,O.D值为纵坐标 (Y...
8、金属对CCK-8的显色有影响：终浓度为1 mM时，氯化铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色...