A:将不含细胞的待测溶液孔中加入 10 μL CCK-8 溶液,孵育 1-4 h 后,测定在 450 nm 处的空白吸光度。若测得的吸光度很小,则说明含有较少的还原剂,正式实验可以直接加入 CCK-8 进行检测;若测得的吸光度相对较大,则说明存在较多还原剂,正式实验时需去除培养基,将细胞洗涤两次后,再加入新的培养基和 10...
高灵敏度:CCK-8试剂对细胞的代谢活力具有高度敏感性,可以检测到细胞活力的微小变化。 操作简便:CCK-8细胞检测方法无需复杂的设备和操作步骤,适用于高通量筛选。只需将CCK-8试剂加入细胞培养物中,并进行吸光度测定即可。 检测快速:CCK-8试剂的反应时间较短,通常在几小时内即可获得结果。相比传统的细胞增殖和细胞毒性...
有时会有影响。如果药物具有还原性,会和CCK8发生显色反应,增加吸光度,解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入CCK8,测定450nm的吸光度。如果它的吸光度比不含药物的培养基(加CCK8)的吸光度高,则证明药物有影响,可在加CCK8之前更换培养基,去掉药物的影响。9、设定参比波长的目的是...
1.注意如果药物具有还原性(如维生素C),会和CCK-8发生显色反应,增加吸光度。2.药物中的金属对CCK-8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氧化铁、硫酸铜会抑制5%,15%, 90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10mM的话,将会100%抑制。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入CCK-8...
若测得的吸光度很小,则说明含有较少的还原剂,正式实验可以直接加入 CCK-8 进行检测;若测得的吸光度相对较大,则说明存在较多还原剂,正式实验时需去除培养基,将细胞洗涤两次后,再加入新的培养基和 10 μL CCK-8 溶液。小白: 那培养基中含有酚红会对最终的实验结果有影响吗?小M: 培养基中的酚红不会...
加入CCK-8溶液:取10ul CCK-8溶液加入96孔细胞培养板,在37℃培养箱中继续孵育0.5-4小时。 测定吸光度:使用双波长检测,检测波长450nm,参比波长610nm。参比波长可以过滤掉因为液体浑浊和孔板底部不干净带来的测量误差。 计算细胞存活率:实验孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液)与对照孔吸光度(含细胞、...
问:CCK-8是什么颜色?答: 应该是粉红色。若颜色不一样,有可能会影响测定。问:设定参比波长的目的是什么?必须设定吗?答: 不一定要设定。CCK-8试剂在参比波长没有吸光度。设定参比波长的目的是为了取出由于样品混浊所带来的吸收。问:CCK-8能否对活细胞进行染色?答: 不能。因为CCK-8的主要成分是一种水溶性...
CCK-8溶液对细胞的毒性非常低,通常观察不到细胞毒性。细胞在CCK-8法检测后仍然可以正常生长,并可以用于其它的细胞实验。但为了避免CCK-8溶液可能带来的对于后续检测的影响,除非该细胞极难获得,否则不推荐把CCK-8溶液孵育过的细胞用于其它实验。3、酚红会影响检测吗?不会。培养基中酚红的吸光度可以在计算时,...
A(加药):具有细胞、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光度 A(空白):具有培养基和CCK-8 溶液而没有细胞的孔的吸光度 A(0 加药):具有细胞、CCK-8 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度 *细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力 除了以上这些,AbMole还有一些Tip送给大家:培养板的选择 除96孔板外,24孔板、12孔板均...
普遍认为,CCK-8是操作更简单、数据更稳定、灵敏度也较高的细胞增殖与毒性检测方法。CCK-8实验过程简单总结为配置细胞悬液、加入待测物质、待测物质与细胞共同孵育一定时间、加入CCK-8、测定吸光度五步。但其中仍有需要注意的地方,值得探讨学习。 CCK-8的实验过程注意细节 01 配置细胞悬液 a. 如果是第一次做...