6)向每孔中加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在加完试剂后轻轻晃动培养板以帮助混匀,或者直接配置含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入。另外注意,加样的过程中尽量不要产生气泡,以免影响OD值读数。 7)将培养板放入培养箱中孵育1-4h。因为细胞种类不同,...
CCK-8实验步骤窗体顶端 窗体底端 CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8 原理:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为...
CCK8实验 CCK-8实验 实验原理 CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂，可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8[化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的...
2. 接种细胞悬液:在96孔板接种细胞悬液,可做多个实验组,每组设置4-6个复孔,同时设置空白组,然后将细胞置于37℃ 5%CO2细胞培养箱中培养12-24 h; 3. 加入CCK-8:两种方法,每孔直接加入10ul的CCK-8溶液,或者配置成含10% CCK-8溶液的培养基以换液的形式加入,注意加入过程中避免产生气泡,可以将枪头浸入培养液...
(3)可能是在换液过程种没有将孔内的液体洗净就加入了新的培养基。 (4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% ...
(3)可能是在换液过程种没有将孔内的液体洗净就加入了新的培养基。 (4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% ...
1. 如果细胞起始的培养体积为200ul,则需加入20ul的CCK-8溶液,以此类推。 2. 建议每个药物浓度孔设置3个复孔,最后取均值做曲线。 3. 设计好实验对照,尽量排除其它因素的干扰: 1)空白对照:可以用加了等量细胞培养液、CCK-8溶液和药物但没有加细胞的孔; ...
实验流程和操作步骤 01 实验分组(每组建议3-6个复孔) 实验组:药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂(见下表黄色列) 对照组:不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂(见下表绿色列) 空白组:不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂(见下表蓝色列) PBS孔:灰色,防止液体过度蒸发 ...
实验人员 方法/步骤 1 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞到培养板内。2 按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每个浓度建议3-6个复孔。3 接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条...
Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂含有WST-8,它在电子载体(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。