专利摘要显示，本发明涉及改造的Cas蛋白。特别地，本发明的改造的Cas蛋白选自有以下各项组成的组：其中野生型AsCas12a蛋白的第400‑415位氨基酸中的一个或多个正电氨基酸被突变为丙氨酸的突变AsCas12a蛋白；其中野生型LbCas12a蛋白的第380‑391位氨基酸中的一个或多个正电氨基酸被突变为丙氨酸的突变LbCas12a蛋白；...
中国科学院动物研究所建立了一种蛋白质工程化改造的新方法（Improving Editing Activity by Synergistic Engineering，简称MIDAS），并利用该方法获得了高活性的Cas12iMax以及高特异性的Cas12iHiFi等基因编辑新工具。研究发现，MIDAS方法能够显著提高来自不同CRISPR家族的Cas核酸酶，如Cas12i、Cas12b及CasX等CRISPR系统的基...
Cas7.1-Cas7.4均具有明显的RRM(RNA recognitionmotif)结构并呈现与Type III-A/B Cas7蛋白 (如Csm3/Csm4)同样的βαββαβ拓扑学结构。Cas7.1-Cas7.4还具有额外的锌指结构域,并且在所有Cas7-11蛋白中保持高度同源。这四个Cas7结构域相互堆...
CRISPR-Cas,Anti-CRISPR 蛋白,蛋白开关,病毒蛋白酶,蛋白质工程 全文导读 1. 发展了计算化学指导的蛋白质工程策略,以抗CRISPR(Acr)蛋白作为模块成功创建了系列CRISPR/Cas(Cas12a)蛋白开关(CasPS); 2. 以CRISPR/Cas(Cas12a)蛋白开关为基本工具,实现了蛋白酶激活的基因编辑以及病毒蛋白酶的高灵敏分析。 背景介绍 具...
本文利用计算化学指导的理性蛋白蛋工程,以抗CRISPR(Acr)蛋白为模块,设计与构建Cas蛋白开关(CasPSs)。通过分子指纹分析、静电势映射和结合自由能计算,精准改造Cas12a与AcrVA4、AcrVA5间的相互作用界面,获得正交的蛋白酶响应型CasPSs。这些CasPSs可将特定蛋白水解事件转化为Cas12a功能激活,实现了哺乳动物细胞中蛋白水解诱...
1.一种人工改造的Cas12蛋白,其特征在于,所述人工改造的Cas12蛋白包括Cas12a蛋白和/或Cas12b蛋白;所述Cas12a蛋白在氨基酸序列SEQ ID NO.1的基础上发生如下突变:L806K和/或R838P;所述Cas12b蛋白在氨基酸序列SEQ ID NO.2的基础上发生如下突变:T379R和/或F380K。
中国科学院动物研究所建立了一种蛋白质工程化改造的新方法(Improving Editing Activity by Synergistic Engineering,简称MIDAS),并利用该方法获得了高活性的Cas12iMax以及高特异性的Cas12iHiFi等基因编辑新工具。 研究发现,MIDAS方法能够显著提高...
其中,Cas12i由于较小的蛋白质尺寸、简单的crRNA及PAM,具有较好的应用潜力。通过MIDAS方法改造的Cas12i具有以下优势和特点:(1)Cas12iMax编辑效率非常高,相较于目前广泛使用CRISPR基因编辑工具(AsCas12a、BhCas12b v4、SpCas9、SaCas9及SaCas9-KKH),展现了更高的平均基因编辑效率。(2)Cas12iMax具有非常广泛的基因...
研究团队建立了一种蛋白质工程化改造新方法(Improving Editing Activity by Synergistic Engineering,简称MIDAS),并利用该方法获得了高活性的Cas12i Max以及高特异性的 Cas12iHiFi等基因编辑新工具。 研究发现,通过 MIDAS 方法能够显著提高来自不同 CRISPR 家族的 Cas 核酸酶,例如 Cas12i、Cas12b 以及 CasX 等 CRISP...
1. 发展了计算化学指导的蛋白质工程策略,以抗CRISPR(Acr)蛋白作为模块成功创建了系列CRISPR/Cas(Cas12a)蛋白开关(CasPS); 2. 以CRISPR/Cas(Cas12a)蛋白开关为基本工具,实现了蛋白酶激活的基因编辑以及病毒蛋白酶的高灵敏分析。 背景介绍 具有可编程响应功能的蛋白开关在生物过程监测与控制中作用关键。CRISPR-Cas系统...