Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。 1 Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化的Caspase-3及对...
与细胞凋亡密切相关的Caspase家族是一组高效蛋白水解酶，通过激活Caspases可以实现细胞的凋亡，其中Caspase-3是最为关键的效应蛋白酶，在生物实验中，Caspase-3可以作为细胞凋亡的指示剂，通过检测其活性强弱可以判断细胞的凋亡情况。背景说明 背景说明 Caspase-3正常以酶原（32KDa）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段...
在此检测法中,细胞核(品红)和caspase阳性细胞(绿色)会被用于训练像素分类器,通过这种方式,像素处理器便有能力分析caspase介导的凋亡细胞比例。 结果 SPY-650-DNA(标记细胞核)和CellEvent™(标记caspase 3/7活性)两种细胞染料的量化研究揭示了在活细胞实验中发生caspase介导的凋亡的细胞。细胞核的数量(此处选择“范围...
用于Caspase-3活性检测的传统技术包括酶联免疫吸附实验 (ELISA)、免疫印迹 (WB) 等,这些方法结果可靠,但是一般来说这些方法的灵敏度较低,特异性不强,检测中需要大量样品,所用的实验仪器设备和抗体试剂成本相对较高,测量步骤也复杂繁琐等。而...
细胞凋亡检测实验-Caspase-3活性检测法Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应...
荧光法检测Caspase-3活性: Caspase-3 Z-DEVD-R110 Assay Kit是以Z-DEVD-R110为酶的特异性底物的。其中,R11O与短肽DEVD通过两个酰胺键共价相连。由于DEVE的存在,抑制了R11O的荧光活性。在Caspase 3催化下, Z-DEVD-R110经过两步逐渐打开共价键,释放出能够发射强烈荧光的R110。通过检测R110的荧光变化来判断casp...
检测mRNA水平的表达，RT－PCR是广泛应用的比较好的方法；检测蛋白水平的表达，可以选择免疫细胞化学，Westen－Blot等，前者可以在细胞内定位但定量效果不佳，后者操作比较复杂，如想在较高水平杂志发表论文最好选择此方法。检测Caspase－3活性还可以选用流式细胞仪来做，且可同时测定Caspase－8等的活性(多通路)。
但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3 的活性明显下降。一、Western blot 分析Procaspase-3 的活化,以及活化的Caspase-3 及对底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]等的裂解。 方法:收集细胞→PBS 洗涤→抽提细胞裂解液→蛋白定量→SDS-PAGE 电泳→硝酸纤维素膜或PVDF 膜转移→5 %脱脂...
Caspase-3活性检测实验Release Time:2020-07-11 一、Caspase-3简介:※ Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。※ Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17...
1.特异性地检测 Caspase 3活性; 2.低浓度的 Caspase 3活性也能检测—即使只有5%的细胞发生调亡也能被检测到; 3.能进行动力学检测。裂解物能稳定保存6个月,允许在多个时间点上进行研究; 4.方便使用高通量的96孔微板检测,能同时检测多个样本。 Caspase 3 Activity Assay 原理示意图 ...