Caspase-3经过细胞外途径和细胞内途径来介导细胞凋亡，细胞外途径或称为死亡受体途径，细胞内途径或称为线粒体途径。在细胞凋亡实验中检测Caspase-3活性的方法主要有Western blot分析、荧光分光光度计分析、流式细胞术分析、酶联免疫分析（ELISA）等。图 细胞凋亡过程中Caspase-3激活示意图（Nichani et al., 2020）...
Western blot检测caspase3 的步骤及原理蛋白免疫印迹检测caspase-3的活化原理及步骤 【原理】 蛋白免疫印迹技术是以某种抗体作为探针,使之附着于固相支持物上的靶蛋白所呈现的抗原部位发生特异性反应,从而对复杂的混合物中的某些特定蛋白进行鉴别和定量。 基本过程:蛋白质样品先经SDS-PAGE分离,后通过电转移将凝胶上的...
如果细胞数量差异较大,可以根据WB结果使用ImageJ软件进行调整。 在电泳过程中,如果发现曝光效果不佳,可以考虑将凝胶中间切开,因为下面可能含有Cleaved Caspase-3。使用分子量较小的抗体时,选择12.5%的凝胶较为合适。 通过这些步骤,可以获得更为准确和可靠的Caspase-3 Western Blot结果。0 0 发表评论 发表 作者最近动态...
Caspase-3是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,在细胞凋亡过程中起到关键作用,被广泛用作凋亡的生物标志物。Caspase-3在凋亡过程中,被剪切成分子量分别为17kDa(p17)和12kDa(p12)的两个片段,并易位至细胞核。Caspase-3经过剪切激活后,可以激活 caspase-6、-7 和 -9,形成
Caspase3_测定Caspase3测定 caspase-3的检测方法: (1)免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞; (2)western blot理想结果:caspase-3有32KD的条带外,还出现了20KD和10KD大小的条带,表明caspase- 3被活化; (3)RT-PCR检测mRNA的表达,用凝胶成像分析系统处理,可以半定量。 Caspases可以在哺乳动物细胞内...
一、Western Blot实验中条带未出现的问题分析及解决方法：1. 抗体失效：- 更换抗体：确保使用新鲜配制的抗体工作液。- 一抗和二抗不匹配：更换为与目标蛋白亚型相匹配的抗体。2. 发光液失效：- 更换新的发光液：使用有效的发光试剂。3. 抗体染色不充分：- 增加抗体浓度：提高抗体使用量以增强染色效果...
蛋白免【原理】 蛋白免疫印迹技术是以抗原部位发生特异性反应,基本过程:蛋白质样品至硝酸纤维素膜上,经封闭将滤膜与辣根过氧化物酶偶光,试剂中的增强剂能使发化发光,并发射波长为 428体-抗抗体复合物在滤膜上的【步骤】 免疫印迹检测 caspase-3 的活化原理及步骤 以某种抗体作为探针,使之附着于固相支持物上的从...
图3C、D结果显示Z-VAD-FMK对NE诱导的软骨细胞凋亡具有保护作用。同时采用western blot法检测caspase相关蛋白水平。如图3E所示,NE处理致使cleaved caspase-3水平增加,并且ERK1/2磷酸化水平降低,呈剂量响应性。这些结果表明NE在软骨细胞中的...
蛋白质免疫印迹检测Caspase-3的活化 预习报告 实验：蛋白质免疫印迹检测Caspase-3的活化预习报告 （北医综合实验）一、Western Blot实验原理 Western Blot (蛋白质免疫印迹法)是将经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维索薄膜——NC膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持...
caspase-3的检测方法 看到过有关caspase-3的检测方法：(1)免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达，用悬浮的细胞；(2)westernblot理想结果：caspase-3有32ＫＤ的条带外，还出现了20ＫＤ和10ＫＤ大小的条带，表明caspase-3被活化；(3)RT-PCR检测mRNA的表达，用凝胶成像分析系统处理，可以半定量。 博凌科为生物...