与细胞凋亡密切相关的Caspase家族是一组高效蛋白水解酶，通过激活Caspases可以实现细胞的凋亡，其中Caspase-3是最为关键的效应蛋白酶，在生物实验中，Caspase-3可以作为细胞凋亡的指示剂，通过检测其活性强弱可以判断细胞的凋亡情况。背景说明 背景说明 Caspase-3正常以酶原（32KDa）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段...
1. 原理:活化的Caspase-3 能够特异切割D1E2V3D4-X 底物,水解D4-X 肽键。根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC。在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC 才能被激发发射荧光。根据释放的AMC 荧光强度的大小,可以测定caspase-3 的活性,从而反映Caspase-3 被活化的程...
下转步骤3d。 对于组织样品:按照每3～10mg组织加入100微升裂解液的比例加入裂解液,在冰浴上用玻璃匀浆器匀浆。然后把匀浆液转移到1.5mL离心管中,冰浴再裂解5分钟。 4℃ 16000～20000g离心10～15分钟。 把上清转移到冰浴预冷的离心管中。 立即测定caspase 3/7的酶活性或-80℃保存样品。同时可以取少量样品用Bra...
devdamc勺caspase3反应缓冲液反应缓冲液使用前加入reagent11孔正常细胞裂解液含cocktail待测样品孔加10胞总蛋白总量50加入样品后立即使用polarstar荧光分光光度计检测amc释放量分析荧光强度激发光波长380nm发射光波长为460nm每10分钟测定一次连续监测120分钟检测条件温度37oc以荧光强度增加倍数代表caspase3酶活性每个样品至少...
caspase-3活性检测试剂盒分光光度法 规格 20T 货号 YS-S963551 测定步骤: 1.加样 1. 除包被外都需45度加样 2.加样体积要准确 3.管底加样,不能加在管壁上 4.加样时不能产生气泡 2.温浴 1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
测定原理基于Caspase-3 特异水解多肽底物 DEVD-pNA (Asp-Glu-Val-Asp-p-nitroanilide),释放的游离硝 基苯胺 pNA在405 nm有最大吸收峰。采用可见光光度比色法测定 pNA 而得到 Caspase活性。适用于检测哺乳动物组织、细胞Caspase-3活性。注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不...
Jimei Caspase 3活性检测试剂盒（比色法）(Caspase 3 Colorimetric A ssay Kit)的检测原理是利用Caspase 3催化底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA)产生黄色的游离硝基笨胺pNA (p-nitroaniline)，通过测定分光光度比色法测定pNA在400~410nm处吸光值，从而间接获得Caspase 3的活性。 产品组成...
流式细胞仪检测，只要是和阴性对照相比荧光信号增高的，就是有caspase激活的。荧光强度越高，酶的活性越...
下面以检测caspase-3酶活性为例,介绍caspase的检测。 1、检测原理 半胱氨酸蛋白酶caspase家族蛋白的激活是凋亡进程中的一个必要的决定性事件。其中caspase-3的激活在凋亡信号传导的许多途径中发挥着关键的作用。Caspase-3正常以酶原(32KDa)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大...
通过Caspase 3/7切割ProRed DEVD阻断肽残基产生强烈红色荧光ProRed,其在~620nm下荧光测量,激发~535nm。Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 红色荧光可用于测量细胞提取物和纯化酶中caspase 3/7的活性,以及筛选caspase 3/7抑制剂。该试剂盒以96孔格式每孔使用100μl试剂,提供足够的试剂进行100次...