1.荧光显微镜检测 caspase-1 活性 用阴性对照(非诱导,a)或 5ng/mLPMA 处理 THP-1 细胞,诱导分化为巨噬细胞(诱导,B)。48 小时后,从诱导的 细胞群中去除 PMA,替换为含 10ng/mLLPS 的新鲜培养基,诱导 caspase-1 活化。2 小时后,使用 FAM-YVAD...
1) 取 50 μL 样本裂解液,按照下表设置反应体系。 2) 加入 Ac-YVAD-pNA 后混匀,37°C 孵育 1~2 h,发现颜色变化较明显时即可检测 OD405。若颜色变化不明显,可适当延长孵育时间到 4 h。
体外表达的重组caspase-1 p20/p10不需要炎症小体来获得活性,且具有较强的蛋白酶活性。在这里,caspase-1以高浓度存在,大大超过正常细胞表达水平,这种高浓度单体促使二聚化发生,而不产生炎症小体,并保持二聚体稳定性。 3 培养基检测 细心的...
还可以用碘化丙啶或Hoechst 33342分析未固定的样品,以分别检测核形态的坏死或变化。艾美捷ImmunochemistryFAM-FLICA Caspase-1检测试剂盒化学性质:试剂名称FAM-YVAD-FMK 目标Caspase-1 激发/发射488nm/530 nm 分析方法流式细胞仪、荧光显微镜、荧光板读取器 样品类型细胞培养 储存2-8°C 艾美捷ImmunochemistryFAM-FLICA...
Caspase1活性检测试剂盒比色法
一、检测原理 Elabscience Caspase 1活性检测试剂盒是基于 caspase 1 可以催化底物Ac-YVAD-pNA 产生黄色的 pNA (p-nitroaniline),pNA 在 405nm 附近有强吸收,从而可以通过测定吸光度来检测 caspase 1 的活性。 二、保存条件 -20°C 可保存一年。Ac-YVAD-pNA (4 mM)应适当分装并避光保存,避免反复冻融。
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 1酶活性或纯化的caspase 1酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。 试剂盒组分: 裂解液———8ml 检测缓冲液———8ml Ac-YVAD-pNA(...
在进行caspase-1活性检测时,应确保刺激条件适当,以促进caspase-1的募集和激活。在体外表达重组caspase-1时,无需炎症小体即可获得活性,且活性较高。在检测样本时,裂解样本应进行超声处理,确保目的蛋白充分释放。同时,保证足够的蛋白上样量,推荐组织样本50~100μg,细胞样本20~50μg。使用0.22μm...
技术检测Caspase-1活性。这些试剂盒包含caspase-1抑制剂,该抑制剂包含caspase-1的首选结合序列Tyr-Val-Ala-Asp (YVAD)。FLICA试剂FAM-YVAD-FMK(最佳激发波长为488-492 nm,最佳发射波长为515-535 nm),是无细胞毒性的,细胞膜渗透抑制剂。进入细胞,并不可逆地与活化的caspase-1结合。任何未结合的FAM-YVAD-FMK-...
使用FAM FLICA Caspase-1检测试剂盒检测caspase-1活性。该体外测定采用荧光抑制剂探针FAM-WEHD-FMK标记活细胞中的活性caspase-1酶。使用荧光显微镜,荧光板读数器或流式细胞仪分析样品。 目录#产品尺寸 916125项测试 9162100次测试 分类:细胞凋亡,Caspase-1,胱天蛋白酶,FLICA® ...