大鼠神经功能缺损情况采用Zea Longa 评分评估，脑梗死体积采用TTC 染色法进行观察，脑组织病理损伤采用HE 染色法分析，采用Caspase -1和TUNEL 免疫荧光双染色法观察脑组织细胞焦亡，Western blot 分析脑组织内NLRP3、Cleaved Caspase -1、IL -18、IL -1β等通路蛋白表达。结果：通过构建大脑MCAO/R 模型发现，黄芪甲...
Image Lab凝胶图像分析系统对胶片扫描后的Western blot反应蛋白条带图像进行分析,得出目标带的灰度值,计算出各组目标蛋白条带的灰度值和内参GAPDH蛋白条带的灰度值的比值;原位末端标记法(TUNEL)染色检测肺组织的细胞凋亡指数 (每张切片选取10个不重复视野,细胞核呈棕黄色染色为阳性细胞,计算每高倍视野中阳性...
采用Target Scan 7.2生物信息学软件，预测miR -664b -3p 与Caspase -1mRNA 的3′非翻译区（3′UTR ）是否存在互补结合位点；分别构建包含结合位点的野生型及突变型Caspase -1mRNA 3′UTR 质粒，双荧光素酶报告基因系统检测miR -664b -3p 对其荧光素酶报告基因活性的影响。结果DVT 组PBMC 中Cleaved Caspase -...
或caspase-1 双荧光素酶 pmirGLO 质粒, miR-15 模拟物、抑制剂及对照核酸片段(negative control, NC), DLX6-AS1 的 3 条干扰小 RNA (small inter原 fering RNA, siRNA)均由北京擎科生物科技股份有 限公司构建或合成。双荧光素酶报告基因检测试 剂盒由美国 Promega 公司提供。 1.2 细胞培养及处理 THP-1 ...
B2象限:Annexin V阳性且PI阳性(双阳性细胞):晚期凋亡细胞; B1象限:Annexin V阴性且PI阳性:坏死细胞。 3.核酸电泳检测(DNA片段检测法) 细胞凋亡时DNA会发生片段化,形成200bp的整数倍;而坏死细胞时DNA发生无规则断裂。因而在凝胶电泳中,如果出现这种显著特征的电泳条带,就可以判断细胞发生了凋亡。
答案: (1)生物膜结构模型的健康发展 ①双分子片层模型发展阶段 该理论认为质膜由双层脂分子组成,脂分子的疏水性非极性尾部相对,而极性头部朝外。极性头部上覆盖着一层蛋白质分子,质膜上蛋白有蛋白质分子组成的小孔穿过脂双分子层,为水和极性分子提供进出细胞的通道。而非极性溶质分子则直接亦非穿越脂双分子层。 ②...
检测项目与方法 HE染色光镜下观察肺组织形态结构的改变;免疫印迹法检测肺组织中Caspase-3蛋白的表达,Image Lab凝胶图像分析系统对胶片扫描后的Western blot反应蛋白条带图像进行分析,得出目标带的灰度值,计算出各组目标蛋白条带的灰度值和内参GAPDH蛋白条带的灰度值的比值;原位末端标记法(TUNEL)染色检测肺组织的细胞凋...
检测项目与方法 HE染色光镜下观察肺组织形态结构的改变;免疫印迹法检测肺组织中Caspase-3蛋白的表达,Image Lab凝胶图像分析系统对胶片扫描后的Western blot反应蛋白条带图像进行分析,得出目标带的灰度值,计算出各组目标蛋白条带的灰度值和内参GAPDH蛋白条带的灰度值的比值;原位末端标记法(TUNEL)染色检测肺组织的细胞凋...
3(1∶1 000)、N-Ca(1∶10 000)、E-Ca(1∶20 000)、Vim(1∶20 000)、MMP14(1∶2 000)、Cyclin D1(1∶20 000)、C-Myc(1∶20 000)和β-actin(1∶20 000)一抗,4℃孵育过夜,二抗(1∶10 000)室温孵育1 h,TBST缓冲液洗涤3次,用ECL发光液避光显影,采用Image-J图像分析软件计算条带的灰度值。
最后将其仅在底物溶液中进行显色,采用BCA法测定蛋白浓度,严格按照BCA蛋白定量试剂盒操作说明书进行,分析灰度值,目的蛋白条带灰度值/内参条带灰度值=目的蛋白相对表达量。 3 统计学方法 采用SPSS 19.5统计软件分析,计数资料采用百分率描述,组间比较采用χ2检验,计量资料采用进行描述,实施F检验,P<0.05表示差异具有统计...