dCas9:一种可逆的基因编辑工具 一、Cas9的结构和功能 Cas9是一种来源于细菌的核酸酶,能够识别和切割特定的DNA序列 Cas9由两个结构域组成:RuvC-和HNH-,分别负责切割DNA的两条链 Cas9需要与单链RNA(sgRNA)结合,才能定位到目标DNA上 二、dCas9的制备和特点 dCas9是一种失活的Cas9变体,通过点突变使RuvC-和HNH-...
dCas9可以结合目标基因组DNA序列,产生空间位阻,阻止其他DNA结合蛋白(如内源性转录因子和RNA聚合酶II)...
通过将RuvC(D10A)和NHN(H840A)两个核酸酶结构域分别进行氨基酸突,从而得到一个没有核酸酶活性的Cas9蛋白,使其失去切割DNA的功能,但仍保留结合DNA的能力,这样的Cas9 称之为dCas9(Dead Cas9)。目前CRISPR/dCas9系统常用于基因组转录调控,用以激活或抑制特定基因的表达,从而达到研究基因功能的目的。图1....
293T ゛s9Nick 细胞是用HEK293T 细胞构建的稳定表达Cas9蛋白的细胞株。在转入gRNA 表达质粒或者化学合成的gRNA 后可以对细胞基因组DNA 进行定点切割。也可以配合验证载体pTYNE 载体实现对基因敲除靶点的筛选和验证。 细胞系构建方法简介:1、 Cas9Nicknase 蛋白慢病毒表达载体pLV ゛s9Nick ﹗ro 包装为慢病毒。2、 ...
dCas9虽然失去了切割DNA的能力,但仍然可以在gRNA的引导下与特定的DNA序列结合。因此,保留Cas9指向gRNA结合DNA序列的能力,同时与转录激活因子、抑制因子、表观修饰酶等效应分子融合表达,将效应因子导向至目标启动子或其他修饰区域,可达到强行激活/抑制特定基因的目的。
Cas9蛋白是CRISPR系统中的核酸酶,能够与特定的引导RNA(gRNA)一起识别和切割DNA,实现基因组的精准编辑。为了成功表达Cas9蛋白,我们需要考虑多个因素,包括选择合适的宿主细胞、表达载体的构建、转染方法以及诱导蛋白表达的条件等。 选择宿主细胞对于Cas9蛋白的表达非常关键。常用的宿主细胞包括细菌、酵母细胞、昆虫细胞、哺乳...
natural Cas9d enzymes are capable of genome editing in mammalian cells with >90% efficiency, and further engineered nickase variants into the smallest base editors active in E. coli and human cells. Their small size, broad targeting potential, and translatability suggest that Cas9d and HEARO ...
发货地 上海 商品类型 化工能源 、 化工试剂 、 实验室试剂耗材 商品关键词 dCas9核酸酶、 dCas9、 Nuclease、 deactivated、 Cas9 商品图片 商品参数 产品名称: dCas9核酸酶|dCas9 Nuclease(deactivated Cas9) 产品规格: 100 pmol 用途范围: 仅做科研,不用于临床 是否进口: 否 加工定制: 否 商品货号...
dCas9惠诚生物现货供应 英文名称: dCas9 总访问: 373 国产/进口: 国产 半年访问: 5 产地/品牌: 惠诚生物 产品类别: 分子生物学试剂 规格: 100pmol 最后更新: 2025-2-5 货号: dCas9 CAS 号: dCas9 参考报价: 咨询17715331663 立即询价 电话咨询 ...
CAS9D10A Plasmid 英文别名: CAS9D10A Plasmid;CRISPR Cas9-D10A Nickase Plasmid 中文名: CAS9D10A 质粒 中文别名: CBNumber: CB72988813 分子式: 分子量: 0 MOL File: Mol file 化学性质安全信息用途供应商1 CAS9D10A 质粒化学性质 储存条件: