基于CRISPR Cas9技术基因敲除小鼠（Cas9-KO）的制作方法 一、CRISPR/Cas9靶向基因敲除小鼠制作的基本技术原理：通过CRISPR/Cas9基因敲除技术，crRNA通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合，形成双链RNA。这一tracrRNA:crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶标的特定位点剪切双链DNA。在与crRNA引导序列...
随后筛选4只左右最适合繁育的F0等待性成熟配繁,经过19-21天的孕期,小仔出生,5-7天进行剪尾鉴定,得到F1代阳性鼠,最后对阳性F1代做复核,就可以供鼠给客户了,从获得阳性F0至获得阳性F1需要3个月左右的周期。阳性F1代小鼠的任意细胞都具有两条染色体,一条来自Founder鼠,一条来自背景鼠。 由于F0不稳定的特点,比如不...