HNH结构域和RuvC结构域分别切割一条DNA链，从而形成DNA双链断裂（图3A）。而对这两个结构域的其中一个进行突变，便可以获得只能切割单链的nCas9（Cas9 nickase）；同时突变两个结构域则可以获得没有切割活性的dCas9 (Cas9 Endonuclease Dead)。这两种Cas9突变体被广泛应用于构建各种遗传操作工具。Cas9切割产生的DNA双...
Cas9 核酸内切酶(Cas9 DNA endonuclease) 特性和用途: Cas9 核酸内切酶(Cas9 DNA endonuclease) 浓 度 1U/ ul 储 存 -20℃ 反应条件 37℃温育 货号 规格 价格 #E025S 20U 800元 #E025L 100U 3200元 应用 Cas9/gRNA特异位点体外剪切DNA,如plasmids、genomic DNA, PCR product 体外检测gRNA的剪切靶点DNA的...
HNH结构域和RuvC结构域分别切割一条DNA链,从而形成DNA双链断裂(图3A)。而对这两个结构域的其中一个进行突变,便可以获得只能切割单链的nCas9(Cas9 nickase);同时突变两个结构域则可以获得没有切割活性的dCas9 (Cas9 Endonuclease Dead)。这两种Cas9突变体被广泛应用于构建各种遗传操作工具。 Cas9切割产生的DNA双链...
6. Sánchez-Rivera FJ, Jacks T. Applications of the CRISPR-Cas9 system in cancer biology. Nat Rev Cancer. 2015 Jul;15(7):387-95. 7. Jinek M, Chylinski K, Fonfara I, Hauer M, Doudna JA, Charpentier E. A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity. Scie...
2. Zetsche, B., et al., Cpf1 Is a Single RNA-Guided Endonuclease of a Class 2 CRISPR-Cas System. Cell, 2015. 163(3): p. 759-771. 3. Cox, D.B.T., et al., RNA editing with CRISPR-Cas13. Science, 2017. 358(6366): p. 1019-1027. ...
[8] Jinek, M., Chylinski, K., Fonfara, I., Hauer, M., Doudna, J. A., & Charpentier, E. (2012). A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity. Science, 337(6096), 816–821. [9] Lucas-Elío, P., ...
[7]Jinek Martin,Chylinski Krzysztof,Fonfara Ines et al. A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity.[J] .Science, 2012, 337: 816-21. [8]Doetschman Thomas,Georgieva Teodora,Gene Editing With CRI...
14. Zetsche B, Gootenberg JS, Abudayyeh OO, Slaymaker IM, Makarova KS, Essletzbichler P, Volz SE, Joung J, van der Oost J, Regev A, Koonin EV, Zhang F. Cpf1 is a single RNA-guidedendonucleaseof a class 2 CRISPR-Cas system.Cell, 2015, 163(3): 759-771. ...
【3】Jinek, M.;Chylinski, K.; Fonfara, I.; Hauer, M.; Doudna, J. A.; Charpentier,E. A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in AdaptiveBacterial Immunity. Science. 2012. 337(6096),816–821. doi:10.1126/science.1225829
基因编辑技术诞生之初, 人们使用的是一些天然的核酶, 而现在, 人们更倾向于使用一些基于特定目标设计的核酸内切酶(engineered endonuclease), 这被称作EEN技术. 这项技术目前有三类实现方式: 锌指核酶(Zinc-finger nuclease, 简称ZFN)、类转录激活因子效应物核酶(transcription activator-like effector nuclease, 简称TALEN...