Cas12f是一种基因编辑技术中的Cas蛋白,它可以通过切割DNA来对基因进行编辑。其工作原理是首先识别目标DNA序列,然后通过切割DNA来破坏其结构,从而实现对基因的编辑。具体来说,Cas12f通过与DNA结合并识别特定的目标序列,然后将其切割成两个部分,从而实现基因敲除或插入等编辑操作。 此外,Cas12f天然起源于古细菌(单细胞生...
Cell Reports | 季泉江课题组开发高效微型CRISPR-SpaCas12f1基因编辑系统；Nat Commun | 高活性、高保真、广靶向范围CRISPR-Cas12f系统开发；Nat Chem Biol丨季泉江团队解析识别罕见富C PAM的微型Cas12f工作机制并工程改造提升编辑活性；Nat Chem Biol | 汤玮欣/赵明磊课题组开发基于Cas12f的迷你基因编辑系统；Nat Catal...
最后研究者还指出，Cas12f有更高的安全性，其脱靶风险低于SpCas9和Cas12a系统。总体而言，研究者成功地将迷你型CRISPR系统Cas12f改造为效率可媲美SpCas9的新一代基因编辑工具。Cas12f在哺乳动物细胞中超强的基因编辑效率、高效的基因激活能力以及单碱基编辑能力，再兼具“体型”上的巨大优势，让人们看到了其在临床治疗应...
与同源酶Un1Cas12f1的复合物结构相比,CnCas12f1的REC识别域存在独特的不同于与其它Cas12f酶的延伸螺旋结构,该特殊螺旋对维持其酶活性至关重要。不仅如此,CnCas12f1与AsCas12f1类似,其sgRNA也含有一个独特的共轴RNA螺旋结构,在Un1Cas12f1中被蛋白中额外增加的锌指结构域所替代,表明Cas核酸酶的蛋白结构域与sgRNA...
Cas12f基因编辑检测方法通常涉及以下步骤: 1.设计CRISPR RNA(crRNA),首先,需要设计与目标基因特定序列相匹配的crRNA。这个crRNA将指导Cas12f蛋白与目标DNA结合。 2.制备Cas12f蛋白,Cas12f蛋白通常需要在实验室中进行制备或购买。这个蛋白将与crRNA一起用于基因编辑。 3.反应混合,将设计好的crRNA和Cas12f蛋白混合,形成...
同年，Virginijus Siksnys团队在Nucleic Acids Research杂志发表研究论文，发现Cas12f核酸酶可以在体外实现PAM依赖性的靶向双链DNA切割【5】。然而Cas12f核酸酶是否具有作为一种新型基因编辑工具的潜力仍尚不明晰。2021年9月2日，上海科技大学季泉江团队在Nature Chemical Biology杂志发表了题为Programmed genome editing by...
研究者首先将dCas12f融合转录因子 VPR后在哺乳动物细胞中进行基因激活测试，然而却无法检测到活力。这也说明天然进化的Cas12f并不适用于哺乳动物细胞环境。因此，他们选择用生物工程技术对整个系统进行改造。首先对sgRNA进行改造，首次观测到微弱的GFP报告系统激活，约有3 %的报告细胞呈现出GFP信号。这给研究者们带来很大...
CRISPRCas12f单链DNA基因编辑成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR-Cas)系统是一种存在于大多数细菌和古菌中的"获得性免疫系统",已被广泛应用于生物,医学等多个研究领域.传统的Cas核酸酶(Cas9,Cas12和Cas13)因为分子尺寸较大,将基因编辑工具精确送到真核细胞内受到阻碍.研究发现,Cas12f是目前已知的最...
此外,与Cas9和Cas12a相比,Cas12f降低了2- 3倍的染色体易位、大片段缺失和载体共整合水平。 本研究结果证实了Cas12f的编辑能力,并揭示了该核酸酶家族在基因组编辑过程中保持基因组完整性的能力。 其中,CasMINI是一个相对更好的选择。 (杨思琪摘译) 发布于 2024-01-07 06:00・IP 属地福建 ...
季泉江教授将作为特邀报告嘉宾出席本次大会,为与会听众带来他最新的研究成果分享《微型CRISPR-Cas12f基因编辑系统:机制与研发》。作为合成生物学领域的专家,季泉江教授主要从事Cas核酸酶挖掘、机制、分子进化等研究,致力于开发易于疾病治疗应用的...