制备异体CART细胞需要进行多基因同时编辑,CRISPR-Cas9这一RNA介导的DNA核酸酶系统是非常适合的技术平台。在此项研究中,利用CRISPR-Cas9系统对CART细胞进行双基因(TRAC和B2M)或者三基因(TRAC,B2M及PD-1)敲除。结果表明,这些经过基因编辑的CART细胞同普通CART细胞相比,在体外及体内具有相当或更强的肿瘤细胞
推荐阅读：“第五代CAR-T”——通用型细胞疗法图3：CAR-T的多重基因编辑技术路线三：核酸酶失活的CRISPR-Cas系统不会产生DSB，但仍可以精确靶向基因组DNA。基于dCas的表观基因组编辑平台可实现稳健的转录激活或抑制（分别为CRISPRa或CRISPRi），用于塑造基因调节和细胞功能（下图4）。图4：基因组和表观基因组编...
在传统的一代CART基础上,采用基因编辑技术如CRISPR/Cas9和碱基编辑彻底改变了T细胞的基因改造,成为CART2.0的主要发展方向,包括通用型UCART,和功能增强的自体CART。 ▪精确性和效率:基因编辑提供高度特异的基因序列靶向,减少脱靶。这种精确性确保快速且准确地进...
基因编辑技术可以实现外源基因的靶向插入或内源基因的定向敲除,精确构建CAR-T细胞,主要在同种异体CAR-T疗法的开发中被广泛使用,其中CRISPR/Cas9精准度高、副作用小,更有利于规模化工业生产。 电穿孔是指一个短的电脉冲作用于细胞,以产生暂时的通透性,并允许编码目的基因的DNA或RNA的注入,转染系统利用mRNA电穿孔介导...
CART、体外基因编辑这类体外基因疗法,可能是一个专利保护不重要、难以仿制、竞争壁垒高、长期现金流的宽护城河资产。 这里说的CART、体外基因疗法主要是那些效果和开发进度都领先的产品,不是所有体外基因疗法都具有这个特征。 1、即使专利过期,也难以仿制。
一步实现:BEAT技术可以一步实现同时非病毒高效插入CAR和单基因或基因编辑,无需传统CART的复杂步骤,显著缩短生产时间。 高效率:BEAT技术结合了AccuBase和FIT技术的优势,具有很高的基因整合效率和编辑效率。 成本效益:BEAT技术的非病毒性质使其生产成本低于传统的病毒载体方法。
CART疗法是找到这种疾病通用的或主要表达的一种抗原,然后用基因编辑技术,将病人身体内的干细胞抽出嵌入一种对这种抗原敏感的杀伤性T细胞,再进行培养增量,到达一定数量级后回输进病人体内,对这种疾病的恶性细胞进行杀灭。因为现阶段都是抽取病人自身的干细胞进行基因编辑,所以没法大批量生产,而制备过程又相对复杂,所以价...
cart细胞制备的关键技术包括以下几个方面：免疫细胞获取：从患者体内获取免疫细胞，一般是从患者体内抽取外周血中的淋巴细胞。基因编辑：利用基因编辑技术（如CRISPR/Cas9等）对免疫细胞进行基因改造，使其表达特定的抗原受体。细胞扩增：通过细胞培养和扩增技术，将编辑后的免疫细胞进行大规模培养，以获取足够...
在此项研究中,利用CRISPR-Cas9系统对CART细胞进行双基因(TRAC和B2M)或者三基因(TRAC,B2M及PD-1)敲除。结果表明,这些经过基因编辑的CART细胞同普通CART细胞相比,在体外及体内具有相当或更强的肿瘤细胞杀伤功能,有望成为临床应用的效应细胞。基因编...