通常,CAR-T细胞的标准制造流程包括细胞采集、T细胞筛选和富集、T细胞激活、基因转导、扩增、储藏及运输、回输患者。 CAR-T细胞的标准制造流程 以基于慢病毒载体的CAR-T产品为例,其主要的制备过程可被分为三部分:慢病毒载体生产、T细胞分离及活化、CAR-T细胞...
CAR-T细胞疗法的制备过程如下: ▲图1 CAR-T细胞疗法的制备过程 CAR-T细胞动力学特征:静脉输注后,CAR-T细胞分布到各种组织,导致循环CAR-T细胞密度暂时下降;在输注后的2-3周内CAR-T细胞增殖扩增到几个数量级并达到峰值浓度(Cmax);最后CAR-T细胞经历活化诱导的死亡,CAR-T细胞数量降低,也有小部分CAR-T细胞维持数月至...
步骤一:T细胞的采集 CAR-T的步是从患者的外周血中提取T细胞。医生通常会使用一种叫做“白细胞分离术”的技术,通过静脉抽血,将血液中的T细胞分离出来。这一过程相对靠谱,通常在门诊进行,患者在采集过程中可能会感到轻微的不适,但总体上是可耐受的。采集后的T细胞将被送往实验室,进入下一步的基因改造。 步骤二:基因...
CAR-T的单采是指利用血液成分分离机采集患者的血液,将含有T细胞的白细胞分离出来。预计采集血量体积为120ml,最少不低于50ml。采集过程,成人血液流速多设定在50~70ml/min,采集人员根据收集管色彩调整收集速度。根据处理的全血量和患者静脉通路的状态,...
如实体瘤在慢性发展过程会产生一个微环境(TME),导致CAR-T无法进入肿瘤内部,因此CAR-T疗法在实体瘤的治疗中没有很好的成效。TRUCK CAR-T将细胞因子(IL-12)或趋化因子导入到CAR中,可以增加T细胞在肿瘤组织中的侵润,同时募集体内其它免疫细胞对肿瘤细胞进行清除;在某些研究中,在CAR结构上连接一个自杀基因或某些药物...
生产CAR-T的第一步,是通过白细胞分离术从患者(或同种异体的供体)处收集外周血单核细胞(PBMC);然后利用基于磁珠的技术分离出特定的T细胞亚群,如CD4+、CD8+、CD25+或CD62L+T细胞。 过程中既要考虑分离得到尽可能多的T细胞(回收率要高);同时要将粒细胞、红细胞、抗凝剂等对后续细胞生产有影响的杂质去掉。譬如,...
规范的CAR由抗体衍生的结合域、间隔区、跨膜域和细胞内主要及共刺激信号域模块化组成。每个结构域可以通过不同的模块构建,这些模块影响不同的变量,并最终影响T细胞的激活和性能。 CAR工程化的细胞毒性T细胞重定向至癌细胞是该技术研究最多的应用;自体抗CD19 CAR T细胞的过继转移成为美国食品药品监督管理局(FDA)批准...
在CAR-T细胞生产制备的过程中,患者还需要接受“清淋”化疗。所谓“清淋”就是用化疗药物清除患者自身的淋巴细胞,为CAR-T细胞发挥作用提供场所。通常“清淋”需要持续三天左右,然后休息两到三天,才能够接受CAR-T回输。 如果患者的肿瘤负荷比较高,或者疾病进展很快,通常还要提前进行桥接治疗,为CAR-T细胞“打前站”,提...
与TCR识别、结合抗原肽-MHC复合物(p-MHC)不同，CAR对肿瘤细胞的识别是scFv识别、结合肿瘤抗原介导的，此过程不受MHC对肿瘤抗原的限制。因此，CAR基因修饰的淋巴细胞对靶肿瘤细胞的杀伤不依赖于MHC。目前，CAR已经发展到第五代，第五代CAR-T细胞增强了其增殖、存活和抗肿瘤活性。二、CAR-T治疗流程：1. 采血：采取...