CAR-T细胞的制备流程复杂(图1)[1],从T细胞的富集、分化、扩增,通过病毒载体进行CAR基因转移,然后再进行体外CAR-T细胞扩增,最终制成细胞产品。目前大部分CAR-T细胞的制备都是以慢病毒载体为主,病毒载体是决定CAR-T细胞能否成药的关键一环。 面对逐渐复杂的CAR转基因序列和细胞工艺,阳性对照成为了工艺开发过程中的重要...
要不更疯狂一点,试一试更“年轻”的TN? 于是,Dr. Khaled开始了第二次尝试,他将Tcm替换成了TN用于生产CAR-T。 (更换T细胞组成用于生产CAR-T的流程图) 这次他成功了吗? 临床前小鼠研究表明,TN细胞来源的CAR-T提高了抗肿瘤效力,而且还提高了细胞产量,缩短了CAR-T的制造时间。 然后,还是熟悉的味道,还是那个I期...
CAR-T细胞的制备流程复杂(图1)[1],从T细胞的富集、分化、扩增,通过病毒载体进行CAR基因转移,然后再进行体外CAR-T细胞扩增,最终制成细胞产品。目前大部分CAR-T细胞的制备都是以慢病毒载体为主,病毒载体是决定CAR-T细胞能否成药的关键一环。 面对逐渐复杂的CAR转基因序列和细胞工艺,阳性对照成为了工艺开发过程中的重要...
图2.(a)通过在患者A和B中制造CART细胞来丰富白细胞分离收获物中存在的中央记忆T细胞群体,直到第8天进行释放测试和冷冻保存为止。增强患者T细胞的持久性。(b)白细胞去除术(第0天)和第8天(CAR T细胞制造过程结束)中T细胞耗竭标志物的表达。(c...
图1. CAR-T生产的各个阶段和工艺方案示例1 CAR-T 细胞治疗的一般流程 1 ● 分离及富集T细胞 生产CAR-T的第一步,是通过白细胞分离术从患者 (或同种异体的供体) 处收集外周血单核细胞 (PBMC) ;然后利用基于磁珠的技术分离出特定的T细胞亚群,如CD4+、CD8+、CD25+...
图1. 自体CAR-T细胞制造流程图。自体CAR-T细胞制造通常包括初始细胞分离、T细胞激活、引入CAR转基因(或mRNA)、细胞扩增和最终配方。大多数产品在输注到患者体内之前在床边进行冷冻保存和解冻。传统的制造过程通常涉及1-2周的体外细胞操作和扩增,而简化的制造过程可以将体外周期缩短至24-72小时。然而,由于运输、产品放行...
图7 CAR-T生产的质量控制流程图 病毒载体如逆转录病毒载体或慢病毒载体经常用于将CAR导入T细胞。应从纯度、安全性、T细胞转染效率和物理化学特性等方面对转染CAR基因的病毒载体进行质量控制。 此外,质控中CAR-T无菌验证必不可少。由于CAR-T是由离体T细胞制备的,期间经过CAR基因的导入和扩增,需要建立CAR-T的无菌检查...
图7 CAR-T生产的质量控制流程图 病毒载体如逆转录病毒载体或慢病毒载体经常用于将CAR导入T细胞。应从纯度、安全性、T细胞转染效率和物理化学特性等方面对转染CAR基因的病毒载体进行质量控制。 此外,质控中CAR-T无菌验证必不可少。由于CAR-T是由离体T细胞制备的,期间经过CAR基因的导入和扩增,需要建立CAR-T的无菌检查...
(2). 治疗流程 CAR-T细胞治疗包括以下几个关键步骤: - 通过血细胞分离机提取患者自身的T细胞。 - 将采集到的T淋巴细胞通过基因工程技术,将CAR基因导入T细胞中。 - 经过体外培养和扩增后,将改造后的CAR-T细胞重新输回患者体内。 (CAR-T制备流程图,图片来源于网络) ...
CAR-T组(A图第三排)的小鼠肿瘤从14天开始逐渐变小,而CAR-NK组(A图第五排)的小鼠肿瘤从第三天就呈现出变小的趋势。图B和C对比了CAR-T细胞、CAR-NK细胞和iPSC-NK细胞在注射后小鼠体内的持久性,三者都表现出显著持久性。 加州大学圣地亚哥分校医学院细胞治疗主任、再生医学系医学教授、医学博士Dan Kaufman表示,...