CAR -T细胞通过三个通路介导靶细胞杀伤: 穿孔素(Perforin)和颗粒酶(Granzyme); 促炎症细胞因子(IFN-γ、IL-2、TNF-α)分泌; Fas和FasL。 因此,通过检测细胞上清中细胞因子分泌的含量来评估此细胞疗法的有效性。 图2 CAR-T细胞杀伤机制(https://doi.org/10.3390/ijms20061283) 为了加速CAR-T/NK等细胞疗法的早...
a. 武装CAR-T细胞:T细胞不仅表达CAR,还会分泌IL-2来抵抗肿瘤微环境的抑制。b. 双受体CAR: 双受体CAR-T包含了识别肿瘤细胞抗原的CAR和把肿瘤细胞分泌的细胞因子转化成活化信号的CAR. c. 自然杀伤细胞(Natural killer cells, NK细胞)受体CAR: 把NK细胞的受体,如NKG2-D,整合到抗原识别域,可增强CAR-T细胞对正常细...
研究者首先体外实验发现了靶向hYP7的CAR-T细胞比靶向HN3的CAR-T细胞具有更强的肿瘤杀伤能力。为了佐证这一结果,研究者采用了Isoplexis单细胞功能蛋白组分析两种CAR-T细胞,结果发现了hYP7-CAR-T细胞具有更高的多功能性指数(PSI)。Isoplexis分析结果和体外效能相一致,为下一步的体内实验提供了重要的质控评估依据。最终的...
1.免疫细胞活力:衡量CAR-T细胞的活性和功能,可以通过测定细胞增殖、产生细胞因子、杀伤肿瘤细胞等参数来评估。 2.细胞存留时间:衡量CAR-T细胞在患者体内的存在时间,通常通过采用标记技术和分析方法来确定。 3.肿瘤负荷减少程度:通过影像学检查和生物学标志物测定,例如肿瘤大小、代谢水平等来评估。 4.患者生存期:通过对...
CAR-T细胞的有效扩增和较长时间的体内存活是肿瘤治疗有效的先决条件。监控CAR-T的细胞增殖活性,让治疗持续性发挥效能。接着是CAR-T细胞的杀伤活性评估,CAR-T专一杀瘤效力也是CAR-T治疗关键的一环。除此之外,不容忽视的是治疗过程中可能引发的细胞因子风暴等免疫反应,常用的评估方式为流式细胞术与显微成像技术,和细...
该方法结合了英国Sphere Fluidics公司的微流控微滴技术以及Granzyme B(颗粒酶B)测定来研究CAR-T细胞介导的细胞毒性。细胞识别和杀伤肿瘤细胞的能力,可以通过T细胞释放的颗粒酶B来进行评估。该方法能快速评估肿瘤治疗细胞产品的功效,从而简化细胞产品的的QC放行。
(5)步骤(1)所述培养体系中加入细胞裂解液,培养时间与步骤(2)相同,肿瘤细胞得到最大程度的杀伤,通过步骤(3)方法检测所得荧光素酶活力值为kmax; (6)计算car-t细胞对肿瘤靶细胞的杀伤效率为: 杀伤效率%=(kmin-k)/(kmin-kmax)x100%。 本发明中,步骤(1)中所述的car-t细胞特异性识别抗原表位,选自cd19、cd...
CAR-T杀伤能力评估 EuTDA Assays 与51Cr释放法检测原理类似的BATDA法是基于时间分辨荧光测定的非放射性方法,与51Cr释放法不同的是该方法不使用放射性元素标记靶细胞却达到与51Cr释放法同水平的敏感性。该方法基于用疏水性配体BATDA对靶细胞进行标记。
研究人员设计了不同版本的SNIP CAR-T细胞,为了快速准确地评估不同版本的CAR-T细胞的杀伤活性,研究人员同样使用了Incucyte 检测了SNIP CAR-T针对靶细胞的杀伤活性,以及药物对SNIP CAR-T细胞的调控活性。Incucyte 的分析结果显示SNIP系统在Off状态下没有明显的“泄露”活性,在ON状态下具有肿瘤杀伤活性且强于组成型的CAR...
文献中的科学证据以及内部研究数据强烈表明,肿瘤细胞对产品的生物学功能有负面影响。因此,对于CAR-T细胞产品,该细胞杂质被评估为CQA。死细胞对MoA没有帮助,可能会对产品安全性和功效产生负面影响;由于CAR-T的死细胞水平处于低水平(通过生存力衡量),因此被视为非CQA。